贵阳医学院2014届硕士研究生论文
组份所加的量
2mol/L Tris碱242g
1mol/L 乙酸57.1 ml
EDTA （pH＝8.0）37.2g
超纯水补足1L
定容后，调节溶液pH＝8.0。
2)使用时用超纯水稀释50³TAE电泳缓冲液为1³TAE电泳缓冲液使其成为
工作液。
2.6 琼脂糖凝胶的配制（2%琼脂糖凝胶，30ml）：
1)取琼脂糖粉0.6g置于一个100ml锥形瓶中，加入1³TAE电泳缓冲液
30ml，微波炉加热2min使琼脂糖完全溶解，冷却至50℃左右后加入1.5
μl DNA染色液（GoldView）(使其终浓度为0.5µg/ml)。
2)将电泳槽制胶板放置于水平台上，插入隔板。
3)用微量移液器吸取少量2%琼脂糖凝胶溶液，密封制胶板与隔板相连处，
待室温凝固。
4)将梳齿安放于制胶板内（距一边缘1cm，距底部约1mm）。
5)向制胶板内倾倒凝胶使其铺平，厚约0.5cm，排除气泡于室温放置30～
45min。
2.7 琼脂糖凝胶电泳步骤：
1)将凝胶放入电泳槽内，点样孔端朝向负极并加入超过凝胶面约1mm高的
1³TAE电泳缓冲液。
2)取适量的样品DNA和Marker DNA，分别与1/5体积的6³加样缓冲液（内
含指示剂溴酚蓝）相混匀。
3)用移液器将混合物小心加入样品槽中，第一孔点样Marker DNA，记录好
点样次序及样品量。
4)盖上电泳槽并通电使DNA向正极泳动。
5)待指示剂泳至凝胶前沿1～2cm处，切断电源并取出制胶板 ,凝胶成像仪
上观察凝胶，记录结果。
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