第三十二章 螺旋体和支原体
螺旋体
1.钩端螺旋体是螺旋体中唯一可进行人工培养的,常用柯氏培养基。不易被碱性染料着色,革兰染色为阴性,常用Fontana镀银染色法镜检。
钩端螺旋体的微生物学检验
①分离培养。钩端螺旋体在培养液中呈云雾状混浊,在半固体培养基上可形成扁平、透明、圆形的菌落。
②鉴定。传代培养后用钩端螺旋体的群和型特异性血清做菌群、菌型鉴定或毒理试验,氧化酶试验阳性、触酶试验阳性、动物试验阳性。
③血清学诊断。目前最常用的是显微镜凝集试验,即用标准株或当地常见菌株做抗原,分别于患者不同稀释度的血清混合,37℃作用2h,然后滴片做暗视野显微检查。一般患者凝集效价在1:400以上或晚期血清比早期血清效价高4倍以上具有诊断意义。
也可采用间接凝集试验,钩端螺旋体特异性抗原致敏的颗粒在玻片上与患者血清中相应的抗体作用,可出现肉眼可见的凝集。此方法灵敏度差,但快速简便。
2.密螺旋体(不能进行人工培养,常用Fontana镀银染色法)
1.直接镜检适用于初期梅毒的检查。
2.密螺旋体的血清学诊断:
①非密螺旋体抗原试验(初筛)。用正常牛心肌的心类脂作为抗原,检测患者血清中的反应素。国际上常用性病研究实验室(VDRL)的玻片试验法。国内常用不加热血清反应素试验(USR)和快速血浆反应素环状卡片试验(RPR),其敏感性和特异性与VDRL相似。
②密螺旋体抗原试验(确诊)。用梅毒螺旋体抗原检测患者血清中的特异性抗体,该试验特异性与敏感性均高。常用方法有:A.荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA‐ABS),为间接荧光抗体法,用用于梅毒的早期诊断;B.梅毒螺旋体抗体微量血凝试验(MHA‐TP),是一种间接血凝试验,其方法简单。
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