本实验通过线栓法制备大鼠视网膜RIRI模型,在模型制备后,通过对其视网膜形态学上的观察,我们认为该方法制备视网膜RIRI模型行之有效。该方法的特点是:对动物创伤小,手术操作方便,动物存活率高。更为重要的是,和目前最为常用的前房灌注加压法相比,该方法使视网膜免于遭受机械性的压力损伤,其形态学上的变化更有利于我们进行临床研究。但线栓的直径和插入的长度有待进一步的探索,从而不断得到完善。
Bax蛋白存在于神经节细胞的胞浆,是一种促凋亡基因。在凋亡诱发因素的刺激下,位于细胞质或松散定位于线粒体膜上的Bax可能通过插入线粒体膜,诱导线粒体蛋白的释放,促进凋亡。
NRG是一种由4种基因编码组成的多肽家族,由NRG?1基因编码产物经选择性剪接后形成,其中共包括4种异构体——NRG?1、NRG?2、NRG?3、NRG?4。NRG?1β被认为与神经元的生存和功能有关,DIMAYUGA等[5]研究显示,无论在离体细胞培养还是在体动物模型上,NRG?1β对中枢神经系统都具有抗炎作用,从而提示NRG?1β可能对缺血性脑损伤具有神经保护作用。缺血诱导的脑损伤和NRG?1β的神经保护作用可通过TUNEL染色结果进行评价,大鼠脑缺血再灌注24 h后,在缺血皮质和皮质下区域内的细胞核中可发现强烈的TUNEL染色。而在大鼠脑缺血再灌注前静脉注射NRG?1β,能够使皮质缺血半暗带内的TUNEL染色减弱。
细胞凋亡的特点是核小体间被活化的核酸内切酶切断,而TUNEL法能使凋亡细胞特异地与断裂DNA的3?OH末端结合,并被显示出来,可在组织切片上检出未发生形态改变的早期凋亡细胞,并进行原位定量、定性分析。
本研究结果显示,凋亡细胞参与了视网膜缺血再灌注损伤发生,在RIRI过程中视网膜GCL存在着明显的凋亡现象,并以缺血再灌注 24 h组最为显著,而这与国内报道的结果也是吻合的[6]。NRG?1β处理各时间点视网膜凋亡细胞数目与对照组相比明显减少,差异有统计学意义;实验组各时间点Bax蛋白的表达较对照组均明显下降,差异有统计学意义。说明NRG?1β能明显减轻视网膜缺血再灌注引起的视网膜细胞的凋亡,具有明显的视网膜保护作用;而抑制Bax的表达,可能是NRG?1β抑制细胞凋亡的机制之一。但NRG?1β在视网膜RIRI中发挥保护作用的具体机制有待于作进一步的研究。
【参考文献】
[1]王景,孟瑞华,尹晓涛,等. 建立猴脑缺血再灌注模型对其视网膜影响[J]. 眼科新进展, 2008,28(4):270?273.
[2]游志鹏,陈珊,赵菊莲,等. TNF?α在大鼠视网膜缺血再灌注损伤中的表达及NAC对其表达的影响[J]. 眼科新进展, 2006,26(5):351?353.
[3]尹晓涛,孟瑞华,王景. 线栓法制备大鼠视网膜缺血再灌注模型的初步探讨[J]. 青岛大学医学院学报, 2008,44(4):357?360.
[4]周晓彬,纪新强,徐莉. 医用统计学软件PPMS 1.5的组成和应用特点[J]. 齐鲁医学杂志, 2009,24(1):29?32.
[5]DIMAYUGA F O, DING Q, KELLER J N, et al. The neuregulin GGF2 attenuates free radical release from activated microglial cells [J]. J Neuroimmunol, 2003,136(1):67?74.
[6]李国栋,袁援生,游志鹏,等. 大鼠视网膜缺血再灌注损伤过程中细胞凋亡的变化[J]. 昆明医学院学报, 2006,27(2):71?73.
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