基本原理:利用某些化学物质和某些细胞成分发生化学结合,从而显示出一定的颜色,进行定性和定位研究的方法。
(二)免疫细胞化学法(特异蛋白抗原的定位与定性)
基本原理:此项技术是将免疫学中抗原、抗体以及补体间专一性反应结合显微或亚显微组织学的一些研究方法的统称。是免疫学原理与光镜或电镜技术的结合。
抗体的标记
抗体标记的方法很多,有铁蛋白标记法、免疫酶标记法、免疫金标记法、杂交抗体标记法、搭桥标记法、同位素标记法、荧光标记法等。
三、细胞内特异核酸序列的定位与定性
(一)DNA序列测定技术
(二)核酸分子杂交技术(moleculargbridizationtechnique)
(特异核酸的定性定位)
概念两条具有互补核酸顺序的单链核酸分子片断,在适当的实验条件下,通过氢键结合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或RNA-RNA双链分子的过程。
印迹杂交(blothybridization)
用已知的带有标记的特定核酸分子(或抗体、蛋白质分子)作为探针,与通过印迹被转移的核酸分子(或抗原、蛋白质分子)片段杂交的过程。
(1)Southernblotting(DNA印迹法)将分离的DNA片段通过毛细管作用转移到硝基纤维素膜上,用DNA探针与之杂交的过程。是以发明此项技术的人名命名的(E?M?Southern)。是体外分析特异DNA序列的方法。
(2)RNA印迹术(Northernblotting)
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