实验9 细胞内糖类的显示
过碘酸雪夫氏反应(peIiodic acid schiff’s reaction，PAS反应)由McManus于1946年在Feulgen反应的基础上发展而来，是显示糖原的最经典、也是最直接的细胞化学方法。该反应首先由强氧化剂过碘酸将多糖中葡萄糖的乙二醇基(CHOH-CHOH)氧化成两个游离醛基(-CHO)，然后，游离醛基再与Schiff's 试剂反应生成紫红色的化合物，颜色深浅与多糖含量成正比。由于单糖在固定、脱水和包埋等组织化学操作过程中被抽提掉，故一般组织标本上所能显示的糖类主要是多糖，包括糖原、黏多糖、黏蛋白、糖蛋白、糖脂、淀粉和纤维素等，它们都是由D-葡萄糖的分支或直链组成，因此要确定此红色物质是否是糖原还需要同时进行对照实验。糖原可被唾液淀粉酶水解，先用唾液淀粉酶作用再进行PAS显色，若反应为阴性，则表明是糖原，反之则为其他多糖。
【实验目的】
掌握多糖鉴定的PAS法的原理与技术，并观察细胞内多糖的分布。 【实验器材、材料和药品】 1．器材
显微镜、剪刀、镊子、解剖针、染色缸、载玻片、盖玻片、吸水纸、恒温水浴箱、小烧杯（10ml） 2．材料
马铃薯块茎 3．试剂及其配制
Schiff试剂、0.5%过碘酸溶液、70%乙醇、pH4.2磷酸缓冲液、淀粉酶 【实验方法和步骤】
切取马铃薯块茎，放入过碘酸溶液中，10min后用70%乙醇漂洗一下。 将薄片放入Schiff试剂中20～25min。 取出薄片放入70%的乙醇中浸1min。
用70%乙醇中冲洗（将薄片放在载玻片上，用吸管吸乙醇滴片）。 加上盖玻片镜检。
对照薄片可于切下后，以pH4.2磷酸盐缓冲液配制的淀粉酶消化40min，再进入染液。 结果：块茎组织细胞内可见到紫红色或深红色淀粉颗粒，对照无色或色淡。 【作业与思考题】
简述PAS法的反应原理，绘图描述细胞内多糖的分布。
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