以经甲醛固定1年以内的尸体12具为研究对象，按年龄分为婴儿组5具,其中0月2具，1、3、5月各1具；青少年组3具，12、22、25岁各1具；老年组4具，63、72、73、81岁各1具。性别不限。标本均取自青岛大学医学院解剖学教研室标本室，生前均无神经肌肉病变。选取颈深肌群中的颈长肌及头夹肌为研究对象，并根据颈椎失稳好发于C5～C7节段的特点[6]，在该节段从肌肉附着点开始沿肌束走行方向锐性分离取下1.5 cm×2.0 cm的组织块（共24个组织块），去除其表面的筋膜及脂肪，进行脱水、透明、浸蜡和包埋；根据神经支配区域性的特点，取标本的C3～C4神经节（共48个神经节），去除表面的筋膜和脂肪，同样进行脱水、透明、浸蜡和包埋。左右两侧的组织均选入实验中。
1.2 实验方法
1.2.1 肌梭的密度测定 将颈长肌、头夹肌组织块分别进行连续性横切片，切片厚度为10 μm，根据BOYD?CLARK等[7]的实验结果（人的肌梭的长度范围约在1.5～4.0 mm），每隔1.5 mm取1张切片，以避免重复计数肌梭密度。共取240张切片，其中婴幼儿组100张，青少年组60张，老年组80张，分别行苏木精?伊红（HE）染色，采用Olympus 显微镜（200倍）和图像分析仪计数肌梭的个数，同时利用Sample?PCI软件测量切片截面积，按以下公式计算该组肌肉的肌梭密度：肌梭密度=肌梭个数/切片面积(mm2）[8]。
1.2.2 NT?3及Trk C表达的检测 采用免疫组化染色方法。将各组背根神经节组织块连续横切，切片厚度为5 μm，用NT?3 及Trk C兔抗血清（滴度均为1∶100）在同一条件下对各组切片行ABC免疫组织化学染色，DAB显色，然后脱水、封片，在Olympus 显微镜下观察NT?3、Trk C在背根神经节的分布。NT?3、Trk C阳性表达细胞均呈棕黄色染色，100倍视野下随机取100个阳性细胞，用Sample?PCI软件对染色结果进行定量分析。
1.3 统计学处理
应用SPSS 12.0统计软件进行数据处理，结果以±s表示，数据间比较采用F检验及t检验。
2 结 果
2.1 不同年龄标本肌梭形态观察及密度的比较
HE染色切片上，肌纤维及肌梭均呈淡红色，肌梭位于肌束之间，大多呈单个的散在分布，附近有小血管，也见肌梭以联合体形式存在。随着年龄的增长，肌梭形态结构发生了一定的变化，主要表现为肌梭体积增大、囊腔扩大及肌梭纤维结缔组织囊增厚。不同年龄组颈长肌及头夹肌肌梭的密度不同，婴儿组高于青少年组及老年组（F=19.28、93.47,q=7.11～16.58，P<0.01），青少年组与老年组无明显差异(q=0.112、0.597,P>0.05）。各年龄组颈长肌肌梭密度均高于头夹肌，差异均有显著意义（t=8.221～12.523，P<0.01）。见表1。表1 各年龄组标本颈深肌肌梭密度比较
2.2 不同年龄标本神经节细胞NT?3、Trk C表达比较
显微镜下各年龄组神经节细胞均可见NT?3、Trk C阳性表达，阳性颗粒沉积于胞浆，细胞核无着色。与婴儿组比较，青少年组染色强度高，老年组染色强度低，差异有显著意义(F=53.32、141.99,q=3.507～23.663,P<0.01)。见表2。各组NT?3、Trk C表达特点：婴儿组内可见NT?3、Trk C广泛阳性表达，神经节细胞无论大小均可见阳性表达，表达强度较强，表达范围广；青少年组中可见NT?3、Trk C阳性表达集中于大中型节细胞，表达强度增强；老年组中可见NT?3、Trk C阳性表达位于大中型节细胞，阳性表达较弱。表2 各组NT?3、Trk C阳性表达比较
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