舒肝健脾补肾方对慢性应激肝郁模型妊娠大鼠、胎鼠宫内发育的干预

                   作者：朱姝，王希浩，张爱华，黄保民

【摘要】  目的研究舒肝健脾补肾中药对慢性应激肝郁模型孕鼠血清P、IGF-1、IGF-2、子宫蜕膜PR水平及胎鼠、胎盘重量的影响，探讨肝郁影响生殖功能的机理及舒肝健脾补肾中药的作用机理。方法复制孕鼠慢性应激肝郁模型，将60只孕鼠随机分为5组：正常组、模型组、舒肝健脾补肾高组、舒肝健脾补肾低组、滋肾育胎丸组。孕19 d剖宫取胎，放射免疫法测定孕鼠血清P、IGF-1、IGF-2的含量，用免疫组化法检测子宫蜕膜PR水平。结果模型组孕鼠血清P、IGF-1、IGF-2、子宫蜕膜PR水平及胎鼠、胎盘重量较正常组明显降低(P﹤0.01)。舒肝健脾补肾高组血清P、IGF-1、IGF-2、子宫蜕膜PR水平及胎鼠、胎盘重量明显高于模型组(P﹤0.01)。舒肝健脾补肾低组与与模型组相比无明显差异(P﹥0.05)。结论舒肝健脾补肾方能提高慢性应激肝郁模型胎鼠、胎盘的重量。能提高孕鼠血清IGF-1、IGF-2的水平、P水平、子宫蜕膜PR水平。研究结果为临床运用舒肝健脾补肾法治疗肝郁型胎儿宫内发育迟缓提供了理论依据。

【关键词】  肝郁模型; 舒肝健脾补肾方; 胎儿宫内发育迟缓

　胎儿宫内发育迟缓是指胎儿出生体重低于同孕龄胎儿平均体重的两个标准差或第10百分位数，是围产儿发病和死亡的主要危险因素之一,还可影响儿童期和青年期发育，影响人口素质[1]。胎儿宫内发育迟缓应属于祖国医学的“胎萎不长”“胎不长”“妊娠胎萎燥”。中医学认为，肝主疏泄，调畅情志。情志不遂，疏泄失职，致肝气郁结，而肝气郁结可致气滞、血淤、痰湿，可影响脾肾功能，导致肝脾肾同病，胎失所养，胎萎不长。

　　本研究通过建立妊娠大鼠慢性应激肝郁动物模型，并以舒肝健脾补肾方药进行干预。实验过程中，观察孕鼠的自主行为，测定P、IGF-1、IGF-2、子宫蜕膜PR水平、胎鼠体重、胎盘重量，从中医肝郁角度探讨胎儿宫内发育迟缓的机理，研究舒肝健脾补肾中药对慢性应激肝郁状态下妊娠大鼠及胎儿宫内发育的影响，从而揭示肝郁影响生殖功能的机理及舒肝健脾补肾中药的作用机理。

　　1 材料与仪器

　　1.1 实验动物分组Wistar雌性大鼠60只，体质量(240±30)g(购自河南省实验动物中心)。按2∶1比例雌雄鼠合笼。每天进行阴道脱落细胞涂片，直到见到大量云片状上皮细胞中夹有大量精子作为妊娠第1天。将孕鼠随机分为5组：即正常对照组(简称正常组)、模型对照组(简称模型组)、舒肝健脾补肾高剂量组(简称舒肝健脾补肾高组)和舒肝健脾补肾低剂量组(简称舒肝健脾补肾低组)、滋肾育胎丸组(简称阳性药组)，每组12只。

　　1.2 药材按原方剂量40倍取材制剂。舒肝健脾补肾方：柴胡360 g，制香附360 g，生白芍600 g，苏梗360 g，黄芩360 g，党参600 g，炒白术600 g，熟地1200g，杞子600 g，生山药1 200 g，菟丝子1200g，川断480 g，寄生480 g。滋肾育胎丸：购自广州中一药业有限公司。国药准字Z44120018，批号：070806。所得制剂浓度分别相当于生药含量的3.82，0.242 g/ml，由河南省中医药研究院制剂室提供。批号：20070810。

　　1.3 试剂及器材P、IGF-1放免试剂盒(购自天津九鼎医学生物工程有限公司)。IGF-2放免试剂盒(购自解放军总医院科技开发中心放免研究所提供)。敞箱(自制)：高为50 cm，长宽均为80 cm,周壁为黑色，底面用白线划分为面积相等的25块。束缚筒(自制)：束缚筒直径为6 cm，长为16 cm。制动箱(自制)：长为40 cm，宽为30 cm，高为30 cm。程控穿梭箱：DCS-2，医科院药研所制。电子秤：EB-2800M，LIBROR。离心沉淀机：LXJ-II，上海医用分析仪器厂。石蜡切片机：Leit2，德国。摊片烤片机：HG3003-3，南京电器三厂制造。微波炉：格兰仕，800W。光学显微镜：GALEN-II3696，BAUSCH LOMB。双目显微镜(自动照相)：BHA，日本。全自动γ-放射免疫计数器：FJ-20089，南京。

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