淫羊藿总黄酮对MPP+诱导MES23.5细胞损伤保护作用

                        作者：徐爱丽 张阳 周丽苹 陈文芳

【摘要】  目的探讨淫羊藿总黄酮对1-甲基-4-苯吡啶离子(MPP+)诱导的MES23.5细胞损伤的保护作用。方法MES23.5细胞常规培养，淫羊藿总黄酮预处理24 h，再用MPP+和淫羊藿总黄酮共同处理细胞24 h，MTT法检测细胞的存活率，实时反转录聚合酶链反应(real time RT-PCR)观察bcl-2和bax基因的表达情况。结果MPP+可剂量依赖性地损伤MES23.5细胞(F=18.38，P<0.001);淫羊藿总黄酮预处理可明显对抗MPP+的毒性作用 (F=44.36，P<0.001);MPP+对bcl-2基因表达没有明显影响，但可明显增加bax基因的表达(F=10.92，P<0.05);淫羊藿总黄酮预处理可明显增加bcl-2基因的表达(F=15.76,P<0.01)，并可逆转bax基因表达的增高(F=10.92，P<0.05)。结论淫羊藿总黄酮可明显对抗MPP+对MES23.5神经细胞的损伤，其作用机制可能与抗凋亡有关。

【关键词】  淫羊藿总黄酮;1-甲基-4-苯吡啶离子;细胞凋亡;MES23.5细胞

　[ABSTRACT]ObjectiveTo study the protection of total flavonoid of Herba Epimedii (TFHE) against 1-methyl-4-phenylpyridinium (MPP+)-induced neurotoxicity.MethodsMES23.5 cells were cultured as routine and pretreated with TFHE for24 h, and then co-treated with MPP+ and TFHE for 24 h. The survival of the cells was observed by MTT method. The real time RT-PCR was used to detect the gene expressions of bcl-2 and bax.ResultsMPP+ damaged MES23.5 cells as a dose-dependent manner (F=18.38,P<0.001). Pretreatment with TFHE could obviously against toxic action of MPP+ (F=44.36,P<0.001). MPP+ had no significant effect on bcl-2 gene expression, but increased the gene expression of bax (F=10.92,P<0.05). Pretreatment of TFHE increased the bcl-2 gene expression (F=15.76,P<0.01) and reversed the increase of bax gene expression(F=10.92,P<0.05).ConclusionTotal flavonoid of Herba Epimedii has an antagonistic action on MES23.5 cells damage induced by MPP+, of which, the mechanism may be related to its anti-apoptosis effects.

　　[KEY WORDS]total flavonoid of Herba Epimedii; 1-methyl-4-phenylpyridinium; apoptosis; MES23.5 cells

　　帕金森病(PD)是一种常见的中枢神经系统退行性疾病，PD的主要病理改变是中脑黑质致密带(SNpc)多巴胺能神经元进行性脱失并伴发黑质纹状体轴突末梢多巴胺耗竭[1-2]。PD的病因迄今未明，发病机制十分复杂，可能有多种因素参与，其中氧化应激和细胞凋亡在PD的发病中具有重要的作用。目前，尚无成熟有效的药物或方法能阻止或逆转PD病情的发展。因此，探索并研制开发有效的防治PD的药物成为当今医药界研究的热点。淫羊藿 (Herba Epimedii)，又名仙灵脾，为我国传统的补肾壮阳中药，历代本草药典均有记载。淫羊藿主要化学成分为黄酮类化合物、木脂素及生物碱，其中黄酮类化合物是淫羊藿主要的药理活性组分。研究表明，淫羊藿具有多方面的药理作用，主要集中在免疫系统、生殖系统、骨骼系统、核酸代谢、心脑血管系统及抗衰老等方面[3-6]。其中对神经系统，有报道淫羊藿提取物可以改善脑缺血和脑低氧;抗抑郁;可以通过调节中枢神经递质水平及酶的代谢，改善学习记忆，延缓脑组织衰老。但是淫羊藿总黄酮对黑质多巴胺能神经元的保护作用及其作用机制的研究，目前尚未见报道。鉴于传统中药作用的多靶点特性，我们推测淫羊藿总黄酮可以对抗神经毒性物质对多巴胺能神经元的损伤。本研究应用1-甲基-4-苯吡472啶离子(MPP+)损伤MES23.5神经细胞，建立PD细胞模型，研究淫羊藿总黄酮的神经保护作用，以期为PD的防治提供进一步的实验依据。

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