大黄附子汤的镇痛作用和对阳虚便秘动物肠运动的影响(2)

　　1.3 仪器

　　JZ100型肌张力换能器，河北省高碑店市新航机电设备有限公司生产。MS?302多媒体化生物信号记录分析系统，广东药学院研制。CS501?3CL型超级恒温器，重庆仪器厂生产。

　　2 方法与结果

　　2.1 小鼠醋酸扭体试验

　　取NIH小鼠60只，随机分成5组，每组12只。即空白对照组、模型组、吗啡组(0.002 g/kg)、大黄附子汤低剂量组(1.75 g/kg)、大黄附子汤中剂量组(3.5 g/kg)、大黄附子汤高剂量组(7.0 g/kg)。 给药组ig给药3 d，每天1次，末次给药为试验前1 h，吗啡为试验前半小时注射给药。每只小鼠腹腔注射0.6%冰乙酸生理盐水0.2 mL，记录20 min内小鼠扭体的次数。 实验数据均以(±s)表示，用SPSS13.0及简明统计软件，组间用t检验进行处理,以P<0.05为差异有显著性。结果见表1。

　　由表1可见，大黄附子汤高、中剂量组能显著减少冰乙酸所致小鼠扭体次数，表明其有镇痛作用。

　　2.2 对阳虚便秘小鼠排便和肠推进的影响

　　NIH小鼠72只，随机分成6组，每组12只。即空白对照组、模型组、通便灵胶囊组(0.5 g/kg)、大黄附子汤低剂量组(1.75 g/kg)、大黄附子汤中剂量组(3.5 g/kg)、大黄附子汤高剂量组(7.0 g/kg)。参照文献[2-4]复制阳虚便秘模型。除空白对照组外，其他各组动物按首剂量0.3 mL/只给醋，第2天起即按0.1 mL/10 g给醋，连续9 d。第7天起，动物给醋的同时按0.4 mL/10 g给10%(φ)的0 ℃活性炭冰水，连续3 d。除空白对照组、模型组外，其他各组动物造模的同时给予相应药物ig给药。第9天末次给药后，所有动物均禁食24 h，把鼠分置于铺有滤纸的钟罩内进行观察，记录小鼠首粒排黑粪时间和3 h内排便量，结果见表2。表1 大黄附子汤对冰乙酸致小鼠因疼痛扭体次数的影响

　　与空白对照组比较:**P<0.01，* P<0.05 另取NIH小鼠72只，分组及给药方法同上。第9天末次给药后，所有动物均禁食18 h，由空白对照组开始，每鼠均给0.3 mL半固体营养糊(由红墨水125 mL、羧甲基纤维素钠5 g、淀粉5 g、奶粉10 g、白糖5 g组成)，20 min后脱颈椎处死。剖开腹腔，分离肠系膜，剪取上端至幽门，下端至回盲部的肠管，轻轻地平铺于桌面上，测定营养糊在肠管内推进长度和肠管总长，计算推进率。推进率(%)=墨汁在肠内推进距离(cm)/小肠全长(cm)×100%。实验期间，所有组动物均未死亡。结果见表2。

　　由表2可见，首粒排便时间模型组与空白组比较，差异有显著性(P<0.01)，阳性组及大黄附子汤低、中、高剂量组与模型组比较，差异有显著性(P<0.01)，说明阳虚便秘模型的复制成功，大黄附子汤能显著缩短阳虚便秘小鼠的首粒排便时间;3 h排便粒数模型组与空白组比较，差异有显著性(P<0.01)，阳性组及大黄附子汤低、中、高剂量组与模型组比较，差异有显著性(P<0.01或P<0.05)，说明大黄附子汤中、高剂量组能显著增加模型小鼠3 h内排便粒数;肠推进率模型组与空白组比较，差异有显著性(P<0.01)，阳性组及大黄附子汤低、中、高剂量组与模型组比较，差异有显著性(P<0.01或P<0.05)，说明大黄附子汤各剂量组都能明显提高小肠推进率。表2 各组小鼠首粒排便时间、排便量和肠推进率比较

　　2.3 大黄附子汤对阳虚便秘大鼠在体回肠活动的影响[5,6] 取大鼠24只，称重，分为3组：空白组、模型组、大黄附子汤组(3.5 g/kg)，模型组和大黄附子汤组动物按首剂量5 mL/只给醋，第2天起即按3 mL/200 g给醋，连续9 d，按照上述方法造模，模型成功后，每组每只大鼠用水合氯醛麻醉。将大鼠背位固定在手术台上，剪去腹中部的毛，沿腹中线做3～5 cm 长的切口，打开腹部，轻轻用手指将回肠提出，找到回盲部，在靠近回盲部选一段3～5 cm 长的回肠段，将肠段两端用缝合线固定在肠管固定管两端的小孔上。再用一条较长的缝合线一端缝在肠段中间的肠壁上，另一端由肠管固定管中央穿出连在肌张力换能器上。然后把回肠放回腹腔内，并用缝合线把肠管固定管缝合固定在腹腔切口的腹壁上，以防肠段滑脱。用止血钳将腹腔切口封闭并用沾有生理盐水的纱布盖好切口。手术完毕后用MS?302多媒体化信号记录分析系统描记一段正常回肠蠕动曲线(5 min)。用温生理盐水(约25 ℃)灌胃2 mL/kg，继续描记曲线，待回肠蠕动曲线稳定后，再用大黄附子汤(约25 ℃ )灌胃3.5 g/kg。继续观察回肠蠕动曲线的变化。结果表明在给药10～15 min后，大黄附子汤组大鼠在体回肠蠕动明显增强(见图1)。

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