2.13 样品中多糖含量的测定精密吸取样品溶液适量,分别用蒸馏水补至1.0 ml,摇匀。按标准曲线项下方法测定吸光度,代入回归方程,计算样品中葡萄糖含量。按下式计算样品中多糖的含量。
多糖含量(%)=C·D·f/W×100
式中:C为供试液中葡萄糖浓度(mg/ml);D为供试液的稀释因素;f为换算因素;W为供试品重量(mg)。结果见表2。表2 威灵仙类药材中多糖含量测定结果(略)
3 讨论
威灵仙多糖具有抗氧化的活性[3],因此本文比较了黔产主要品种柱果铁线莲和山木通与药典威灵仙品种的多糖含量,实验结果显示威灵仙、柱果铁线莲、山木通中多糖的含量差异较大,其中山木通药材的多糖含量最高。同一品种的多糖含量差异也较大,可能是因为生长环境影响了多糖的含量。
本文采用硫酸-苯酚法对威灵仙类药材中的多糖含量进行了测定,硫酸-苯酚法的测定原理为多糖类物质在硫酸的作用下,先水解成单糖分子,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后和苯酚合成为有色化合物,用比色法对其进行测定[6]。苯酚极易氧化,见光或空气即逐渐氧化变成淡红色,因此在使用前必须纯化苯酚,在测定中要避光和操作迅速,这样才能获得稳定可靠的结果。
在样品液制备中,先用80%乙醇除去单糖、低聚糖和苷类等干扰成分,然后再用水提取多糖类成分。在加样回收试验中,采用加入威灵仙混合多糖的方法进行测定,这是目前同时测定多个品种中多糖含量的常用方法,如果加入标准物葡萄糖,则在制备样品时葡萄糖可能被80%乙醇溶解除去,会对实验结果带来很大影响。
【参考文献】
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[4]王亚,陈 彦,孙玉军.中药威灵仙研究概况[J].中药材,2006,29(5):513.
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[6]王新,陆慧宁,林少琨.苦丁茶冬青叶多糖的提取及含量测定[J].时珍国医国药,2006,17(10):1977.
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