从图3曲线可知,采用清除率极大值点或其他特征点所对应的抗氧化剂含量来比较DPPH自由基清除能力的方法比较合理。由于极值点测定比较困难,误差较大,而自由基清除率在50%时对应的点较容易在曲线上标定,因此选定抗氧化剂的自由基半清除率IC50值为测定指标。采用该法测定的槲皮素、抗坏血酸、没食子酸的IC50为6.56,5.32,5.45。结果见图4。
3.4 不同提取方法清除DPPH自由基的能力按“2.1.1”,“2.1.2”,“2.1.3”不同方法提取,使用相同溶剂得到提取物,逐级稀释,按“2.2.1”方法测定,结果见图5。
不同提取方法得到的提取物都具有一定的清除自由基的能力,在一定浓度范围内,呈现正向变化,但随着浓度增加到一定值后,清除率趋于平缓。回流提取得到的提取物的IC50为2.15,超声提取得到的提取物的IC50为1.82,温浸提取得到的提取物的IC50为1.52,回流提取得到的提取物的IC50最高。
3.5 不同溶剂提取物清除DPPH自由基的能力按“2.1.1”回流提取法分别用95 %乙醇,水,丙酮提取,逐级稀释,按“2.2.1”方法测定。结果见图6。
3种溶剂提取物都具有一定的清除自由基活性的能力,且随着提取物浓度增加,清除率逐渐增高,但随着浓度增加到一定值后,清除率趋于平缓。在浓度范围内,赶黄草95 %醇提物的IC50为2.28,水提物的IC50为1.66,丙酮提取物的清除能力最弱,IC50为1.30。其差异可能是因为溶剂的极性不同,使其对赶黄草中抗氧化活性物质的溶解度不同,所提取的抗氧化物质的总量和种类也就不同,导致了不同溶剂提取液的清除DPPH自由基能力不同。
3.6 不同极性部分清除DPPH自由基的能力根据实验结果,选择回流提取法,按“2.1.4”方法将提取液萃取为极性不同的4个部分:石油醚部分,醋酸乙酯部分,正丁醇部分以及水部分。按方法“2.2.1”测定。结果见图7。
从图7看出,在4个不同的极性部分中,清除DPPH自由基能力最强的部分是醋酸乙酯部分。赶黄草有效成分主要是黄酮化合物如槲皮素等存在于该极性部分,表明赶黄草中黄酮化合物具有较强的清除自由基的能力。
3.7 与抗坏血酸的清除自由基能力比较抗坏血酸是常用的抗氧化剂,将乙醇提取物按不同浓度用“2.2.1”项下方法测定,与相应浓度抗坏血酸比较,由图8可知,赶黄草乙醇提取物的清除自由基能力在达到一定浓度后接近抗坏血酸用的水平。
4 结论
回流提取法是最适合提取赶黄草中有效成分的方法,其具有操作简单,方法稳定的特点。
赶黄草提取物均具有清除DPPH自由基的作用,95 %乙醇提取物的清除DPPH自由基作用最强,以下依次为水、丙酮提取物。 不同方法提取物清除DPPH自由基的结果表明,在一定浓度范围内,赶黄草提取物浓度越大,其清除自由基能力越强。
在石油醚、醋酸乙酯、正丁醇和水4个不同极性部分中,清除DPPH自由基能力最强的部分是在醋酸乙酯萃取部分。
赶黄草种质资源在四川、贵州、湖南都有分布,但目前其经济价值被开发利用(药用、保健)的还很少。本研究通过对赶黄草提取物中具有抗氧化作用的活性物质对DPPH自由基的清除能力进行了考察,证明了赶黄草具有很强的抗氧化作用,这对于赶黄草的综合利用和进一步开发具有重要意义。
【参考文献】
[1]中国科学院植物研究所.中国高等植物属检索表[M].北京:科学出版社,1979:205.
[2]全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编,下册,第2版[M].北京:人民卫生出版社,2000:480.
[3]张 旭,杨 明.赶黄草有效成分研究[J].成都中医药大学学报,2005,25(4):46.
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