安徽医科大学硕士学位论文
二氨基联苯胺四盐酸盐(Diaminobenzidine,DAB),购于福州迈新生物技术
开发公司。
2.3实验原理
免疫组化采用链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶(Streptavidin—peroxidase,
SP)法,其基本原理为:一抗与组织切片中的抗原结合后,用生物素标记的二抗
与一抗结合,再使用链霉菌抗生物素蛋白(Streptavidin)一过氧化物酶
(peroxidase)放大系统产生低背景、高放大效果,DAB被酶分解后显色来测定组织细胞中的抗原。S--P法比ABC法等具有特异性更强、背景更清晰、节省抗体等优
点,是目前免疫组化技术中最具优越性的染色方法。见图1。
6
ENZ:过氧化酶或磷酸鲜
图1免疫组化sP法原理示意图
FigurelRationaleofSPimmunohistochemicalmethod
2.4实验方法和步骤
全部标本10%甲醛固定,常规石蜡包埋,连续4
u
m切片,采用免疫组化
SP技术检测标本中PTEN、VEGF和MMP2表达。对于不同组织、不同检测指标,
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