百草枯染毒急性肺损伤大鼠肺组织NO、ET和TNF-α的含量及茎叶人参

【摘要】  目的探讨百草枯染毒急性肺损伤大鼠肺组织NO、ET和TNF-α的含量及茎叶人参皂苷的干预作用。方法采用百草枯染毒急性肺损伤大鼠模型，随机分为正常对照组(NS组)、模型组(ALI组)、皂苷组(GS组)。观察茎叶人参皂苷对百草枯染毒急性肺损伤大鼠肺组织NO、ET和TNF-α的含量的影响。结果ALI组肺组织NO含量和NOS活性明显升高，与NS组比较有统计学意义(P<0.05);与ALI组比较，GS组肺组织NO含量和NOS活性降低(P<0.05，P<0.01)。ALI组肺组织ET含量高于NS组(P<0.01)，而GS组肺组织中ET含量低于ALI组(P<0.05)。ALI组肺组织TNF-α的含量高于NS组(P<0.05);GS组肺组织中TNF-α低于ALI组(P<0.05)。结论茎叶人参皂苷可以减少TNF-α因子的释放，抑制NO、ET的升高，从而保护细胞免受低氧损伤，减轻肺血管收缩程度和炎症反应。

【关键词】  急性肺损伤; 茎叶人参皂苷; 百草枯; 内皮素; 肿瘤坏死因子-α

炎症反应的失衡是急性肺损伤(ALI)的本质原因，表现为促炎反应抗炎反应的失衡。其特征为，由肺间质急性炎症反应而导致的肺内皮和上皮细胞屏障损伤，而炎性因子作为重要的信号因子，启动、放大和延续全身或局部的炎症反应。TNF-α是最重要的前炎性因子之一。有报道称NO和ET参与了ALI的病理生理过程[1]，本研究通过百草枯(PQ)诱导的ALI模型，观察肺组织NO、ET及TNF-α的含量，探讨NO、ET及TNF-α参与ALI的作用机制及茎叶人参皂苷的干预作用。

　　1 材料

　　清洁级健康Sprague Dawley(SD)大鼠45只，体质量(300±40)g，由河南省实验动物中心提供〔实验动物生产许可证号：SCXK(豫)2008-0017;实验动物使用许可证号：SYXK(豫)2008-0105〕。茎叶人参皂苷粉剂(stems and leaves Ginsenoside)由辽宁大自然生物科技公司提供; TNF-α放射免疫药盒由上海赛百胜生物工程公司提供;20%百草枯浓缩液由上海先正达农药有限公司生产;NO 、NOS及ET测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所提供。

　　2 方法

　　2.1 分组及模型的建立将45只SD雄性大鼠，随机分为肺损伤组(ALI组)、皂苷组(GS组)和正常对照组(NS组)。皂苷组提前3 d给药，给予腹腔注射皂苷50 mg/kg，1次/d，连用3 d。3 d后，肺损伤组及皂苷组均一次性灌胃80 mg/kg百草枯，正常对照组只给等量的生理盐水。

　　2.2 观察指标在造模72 h后分批处死各组实验动物，腹主动脉取血(1∶500u肝素抗凝)行血气分析，腹主动脉放血处死大鼠;取大鼠左下肺组织计算肺系数;取左上肺进行TNF-α，ET ，NO及NOS含量的测定;取右肺组织肉眼观察和病理HE染色200倍光镜下观察。

　　2.3 统计学方法计量资料数据以±s表示。不同时间点的比较采用单因素方差分析(one-way ANOVA)进行组间比较，以最小显著差异法(LSD法)进行不同组别之间的两两比较。采用SPSS10.0统计软件进行数据处理。P<0.05为差异有统计学意义。

　　3 结果

　　3.1 肺损伤指标模型组PaO2明显低于对照组(P﹤0.05)，肺系数明显高于对照组(P﹤0.05);皂苷组PaO2较模型组有所增加(P﹤0.05)，而肺系数也较模型组减低(P﹤0.05)。结果见表1。表1 茎叶人参皂苷溶液对PQ致ALI大鼠PaO2及肺系数的影响与NS组比较，★P<0.05; 与ALI组比较，△P<0.05;n=15

　　3.2 肺病理

　　3.2.1 肺外观及变化

　　NS组：大鼠肺组织表面光滑，呈淡粉红色，无充血水肿及梗死灶，触之弹性较好。

　　ALI组：肺肿大，边缘钝，严重肺淤血、水肿，部分肺有弥漫性出血，胸腔内有血性液体，部分肺组织呈暗红色，质地中等;肝样变，表面及肺切面处可见有团块状白色坏死物质，部分中毒大鼠胸腔有渗出液。

　　GS组：肺淤血水肿明显，部分标本也有弥漫性出血，但较ALI组出血区域和损伤程度减轻。

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