金鸡菊提取物降血压化学成分实验研究(2)

　　1.4 仪器BL-410生物机能实验系统、FT-100生物张力传感器，成都泰盟科技有限公司生产;DL-501型超级恒温器，上海试验设备厂制造;混合气体(95% O2+5%CO2)，乌鲁木齐西明特种气体有限公司。

　　2 方法

　　2.1 金鸡菊有效成分的提取金鸡菊全草500 g，粉碎，分别用体积分数为95%的乙醇回流提取2次和用50%的乙醇回流提取1次，料液比1∶10，2 h/次，合并3次的提取液，减压浓缩回收溶剂得浸膏150 g。再对浸膏进行分层萃取，具体流程见图1。

　　2.2 金鸡菊提取物对血管环张力的影响

　　2.2.1 胸主动脉血管环的制备与稳定[3]大鼠断头处死，开胸迅速取出胸主动脉， 置于预先用混合气体(95%O2和5%CO2)饱和的4℃的 K-H液中，冲洗至无血迹，小心地去除外周的脂肪组织和结缔组织，并剪成2～3 mm长的血管环，将血管环置于盛有10 ml的K-H液(37℃恒温，并持续通入95%O2和5%CO2的混和气体，pH=7.4)的恒温套瓶中，每一根血管环用两个三角型挂钩贯穿血管环管腔，一端固定，另一端连接于张力传感器，张力变化由BL-410生物机能实验系统采集并记录。血管环加静息张力2 g左右，稳定90 min，期间每15 min用预温至37℃的K-H液更换液体。待血管环完全稳定后，即可进行正式实验。图1 金鸡菊有效成分提取、分离流程图

　　2.2.2 金鸡菊不同提取物对血管环基础张力的影响[3]待血管稳定后，记录静息血管环张力，以此作为100 %效应，采用累积加药方法，每5 min加入金鸡菊各个浓度的不同提取物，使灌流液中提取物终浓度分别达0.03，0.10，0.30，1.00，3.00 g/L，记录张力变化，描绘量效曲线，计算其舒张率(%)，并以等量9.0 g/L氯化钠注射液(NS)作为对照。

　　舒张率(%)=加受试药后张力-血管环基础张力血管环基础张力×100%

　　2.2.3 金鸡菊不同提取物对氯化钾预收缩的血管环张力的影响待血管环稳定后，用60 mmol/L的KCl重复刺激3次，诱发血管的最大收缩幅度，连续3次同样的刺激所引起的收缩幅度差别<10%时，以此做为100%收缩张力。按浓度梯度分别加入各提取物(终浓度为0.03，0.10，0.30，1.00，3.00 g/L)、普萘洛尔阳性对照药(终浓度为0.001，0.003，0.01，0.03，0.1 0 g/ L)，空白对照组给予等量的9.0 g/L氯化钠注射液，记录其张力变化。

　　舒张率(%)=加受试药后张力-加受试药前张力药物刺激后张力-药物刺激前张力×100%

　　2.3 统计学方法 所有数据以 ±s表示，两组之间的比较采用t检验，P﹤0.05表示有统计学差异，P﹤0.01表示有显著性差异。

　　3 结果

　　3.1 金鸡菊不同提取物对血管环基础张力的影响金鸡菊不同提取物的累积浓度(0.03，0.10，0.30，1.00，3.00 g/L)对基础状态的血管环张力均无显著影响(P>0.05)。结果见图2。

　　图2 金鸡菊不同提取物对血管环基础张力的影响

　　3.2 金鸡菊不同提取物对氯化钾预收缩的血管环张力的影响金鸡菊不同提取物的累积浓度(0.03，0.10，0.30，1.00，3.00 g/L)对氯化钾预收缩的血管环均有不同程度的舒张作用，其中氯仿提取部位和醋酸乙酯提取部位舒张作用较为明显，在终浓度为3.00 g/L时舒张率分别可达到115.24%(P<0.01)和103.53%(P<0.01)。结果见表1。

　　4 讨论

　　表1表明：金鸡菊不同提取物确实能舒张氯化钾预收缩的血管环，尤其是氯仿层和醋酸乙酯层，推测这可能是归功于这两个不同极性部位里的活性成分-黄酮类化合物。黄酮类化合物具有多种多样的生理活性，尤其对心血管疾病(高血压病、高血脂等)有很好的作用[4]。豆科植物葛根中的异黄酮类化合物对高血压动物有一定的降压作用，其降压机制是通过β肾上腺素受体阻滞作用而完成的[5];夹竹科植物罗布麻叶降压有效成分主要是总黄酮和碳水化合物[6];菊科植物野菊花乙醇浸提物主要含有野菊花内酯、黄酮苷等对麻醉猫、正常狗均有一定的降压效果[7]。

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