1 材料与方法
1.1 材料来源
选取成年健康新西兰兔58只，性别不限，体质量为2.3～3.3 kg，由山东农业科学院实验动物中心提供。
1.2 实验动物模型建立和分组
应用线栓法建立大脑中动脉栓塞（MCAO）模型，所有模型均于缺血1 h后行MR检查，DWI上出现异常高信号区作为模型成功的标准[4]。将制作成功的永久性缺血动物30只分为A1～A6组，即缺血后1、3、6、12、24及48 h组，每组5只。另取5只作为对照组（A0），线栓插入颈内动脉后即刻退出，其余步骤同实验组。
1.3 MR扫描方法
采用GE Signa 1.5 T MR扫描仪，标准头线圈，在定位像上以视交叉平面为中心行冠状位连续扫描5层，层厚3.0 mm，层距1.0 mm。DWI扫描参数：TR 7 000 ms，TE 84 ms，FOV 14 cm×14 cm，矩阵128×128，在X、Y和Z轴三个方向分别施加扩散敏感梯度（b值取0和1 000 s/mm2）。A1～A6组分别于缺血后1、3、6、12、24及48 h时间点行DWI检查。各组动物的DWI原始图像转到ADW 2.0工作站进行图像后处理，Functool软件重建ADC图。采集各模型DWI的ADC，并计算rADC，计算方法为：rADC=（病侧ADC/对侧ADC）×100%。在DWI显示病灶范围最大的层面上测量高信号区的面积，并计算其占同侧大脑半球面积的比率（p值）。
1.4 血清NSE和S?100蛋白检测
各组动物在规定的时间点，经心脏穿刺取血5 mL，4 000 r/min离心10 min，取上清，-20 ℃冰箱保存待测。采用双抗夹心ELISA法检测血清中的NSE和S?100蛋白含量。试剂盒由天津灏洋科技有限责任公司提供。取出包被有抗NSE或S?100蛋白特异抗体的酶标板，每孔加入100 μL标准品和待测家兔血清，37 ℃温育60 min。洗涤液洗板3次，用吸水纸拍干，加入100 μL生物素化抗家兔NSE或S?100蛋白抗体，37 ℃温育60 min。洗涤液洗板3次，吸水纸拍干，加入100 μL辣根过氧化物酶标记的抗生物素蛋白链菌素，37 ℃温育30 min。洗涤液洗板3次，吸水纸拍干。每孔加入100 μL的TMP显色液，置37 ℃暗处温育15 min，每孔加入100 μL终止液，30 min内在酶标仪于450 nm波长处读取吸光值，以吸光度值为纵坐标，以标准浓度为横坐标，绘制标准曲线。根据样品吸光值在标准曲线上查出其浓度。
1.4 统计学处理
用Excel表格录入数据，所有数据以±s表示。统计学软件采用SPSS 13.0及PPMS 1.5[5]。兔脑缺血后不同时间点血清NSE和S?100蛋白含量的变化，用多样本均数单因素方差分析及q检验。A2～A6各组模型内两个时间点的ADC值、rADC值和p值间比较，用配对设计资料t检验。
2 结果
2.1 缺血不同时间血清NSE和S?100蛋白含量的变化
兔脑缺血6 h后血清中NSE的含量较A0组明显升高，至缺血24 h达到高峰，48 h后下降，但仍高于A0组（F=4.28,q=5.13～6.03，P<0.05）。兔脑缺血6 h后其血清S?100蛋白的含量较假手术组明显升高，至缺血24 h达到高峰，48 h后下降，但仍高于A0组（F=6.25,q=4.67～6.86，P<0.05）。见表1。
2.2 缺血组平均ADC值、rADC值和DWI高信号区的范围变化
A0组5只动物行MR检查均未发现DWI高信号及ADC值的异常。缺血组缺血1 h的DWI上均显示明显高信号并伴有ADC值下降。缺血1 h时感兴趣区（ROI）平均ADC值为（55.34±3.45）×10-5 mm2/s，rADC=（70.67±1.67）％。在不同的缺血时间点，各组平均ADC值和rADC值呈先下降后上升的趋势。其中缺血6 h时ADC值最低，以后逐渐升高，48 h恢复至略高于1 h时水平，其差异均有统计学意义（t=2.92～6.88，P<0.05）。A2～A6各组内前后两个时间点p值差异均有显著意义（t=2.79～13.76,P<0.05）。见表2。
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