超微归脾丸对D-半乳糖衰老模型小鼠抗衰老作用的研究(2)

　　2.5 给药方法将普通归脾丸、超微归脾丸均用蒸馏水溶解，配成相当于生药材1.0 g/ml的药液，超微归脾丸低、中、高剂量组均灌服超微归脾丸药液，普通归脾丸组灌服普通归脾丸药液。根据日服用剂量，按人体模型表面积换算后给药剂量分别为：超微归脾丸高剂量组15.50 g/ ( kg·d)、中剂量组8.00 g/ ( kg·d)、低剂量组3.89 g/ ( kg·d)，普通归脾丸组按超微归脾丸中剂量组给药，模型组、空白对照组给予中剂量同体积生理盐水。

　　2.6 指标测定连续给药45 d后，颈椎脱臼处死小鼠。取胸腺、脾、肝称重测定脏器指数;同时将肝及脑制成1%组织匀浆(组织匀浆的制备按试剂盒说明)，按试剂盒中方法测定肝及脑组织SOD的活力、MDA的含量、GSH-Px活性。

　　2.7 统计学分析数据均采用SPSS12.0软件完成统计处理。结果以±s表示;计量资料组间差异比较采用t检验。

　　3 结果

　　3.1 各归脾丸对小鼠胸腺、脾、肝脏指数的影响实验结果见表1。由表1可知，与模型组比较，各归脾丸组均能显著提高亚急性衰老小鼠模型的鼠的脏器指数(P<0.05，P<0.01)，超微归脾丸低、中剂量组与普通归脾丸组相比，差异无统计学意义，超微归脾丸高剂量组与普通归脾丸组相比差异有统计学意义(P<0.05，P<0.01)。从胸腺、脾脏器指数的比较可知，普通归脾丸组与超微归脾丸各剂量之间无明显区别，同时超微归脾丸各剂量之间也无显著性差异。表1 各归脾丸对小鼠胸腺、脾脏、肝脏的影响与模型组比较，●P<0.01，▲P<0.05; 与普通归脾丸组比较，◆P<0.01，■P<0.05;n=5

　　3.2 各组小鼠肝脏MDA含量、SOD和GSH-Px活性测定结果见表2，与模型组比较，普通归脾丸组、超微归脾丸低、中、高剂量组的肝MDA含量、SOD和GSH-Px活性都具有显著性差异(P<0.05)。与普通归脾丸组相比较，超微归脾丸低、中、高剂量组的肝MDA含量和SOD都有显著性差异(P<0.01);与普通归脾丸组相比较，超微归脾丸中、高剂量组的GSH-Px活性明显升高(P<0.01)，但超微归脾丸低剂量组却无显著性差异。表2 不同组别小鼠肝组织中MDA含量、SOD和GPX活性检测结果与模型组比较，●P<0.01，▲P<0.05; 与普通归脾丸组比较，◆P<0.01，■P<0.05;n=5

　　3.3 各组小鼠脑MDA含量、SOD和GSH-Px活性测定结果见表3。与模型组比较，普通归脾丸组、超微归脾丸低、中、高剂量组的脑MDA含量、SOD和GSH-Px活性都有显著性差异(P<0.05，P<0.01)。与普通归脾丸组比较，超微归脾丸低、中、高剂量组的脑MDA含量、SOD和GSH-Px活性均无明显区别。表3 不同组别小鼠脑组织中MDA含量、SOD和GPX活性检测结果　与模型组比较，●P<0.01，▲P<0.05; 与普通归脾丸组比较，◆P<0.01，■P<0.05;n=5

　　4 讨论

　　本实验通过小鼠颈背部皮下注射300 mg/(kg·d)的3%D-半乳糖生理盐水溶液，连续注射45 d造亚急性小鼠衰老模型。由实验结果可知：模型组小鼠肝、脑的各抗氧化指标明显高于或低于空白对照组，重要的组织器官胸腺、脾以及肝脏显著性萎缩，说明本实验造模成功。

　　MDA是一种脂质过氧化产物，能引起细胞代谢及功能障碍，因而引起细胞损伤，进而加速机体衰老[3，4];SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力[5];GSH-Px是机体内广泛存在的一种重要的催化过氧化氢酶[6]，测定GSH-Px可以间接的反应细胞的完整程度。饲养动物45 d后，给予归脾丸的各组小鼠的抗氧化指标如肝、脑的MDA含量、SOD和GSH-Px活性均有明显改善，其中超微归脾丸对D-半乳糖所致亚急性衰老小鼠肝的作用明显优于普通归脾丸，提示归脾丸具有直接或间接的降低机体内脂质氧化程度，增强机体清除自由基的能力，保护细胞的结构和功能的作用，从而达到改善机体物质代谢絮乱及延缓机体衰老的功效。但此作用对脑的影响较弱，可能是由于归脾丸是口服给药，有效成分难以透过血脑屏障而发挥作用。

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