Siemens Advia 系列生化仪参数详解 - 图文(2)

图4 EPA终点法示意图

RRA反应方法：也就是常说的速率法，可以是单速率法，也可以是双速率法。采用单速率法时，读取主读点区的m和n的区域进行每分钟速率计算。采用双速率法时，还要读取R2加入之前的子读点区p和r的区域进行每分钟速率计算，然后主读点和子读点相减再进行浓度计算。使用速率法时，系统将自动进行E2吸光度计算。但在参数设置，可以选择是否选择E2 corre ，也就是是否选择E2修正。用DO或Not Do选择。

在速率法当中，Blank u/d必须输入，并且可以选择在R2加入前一点插入检查点CHECK D.P.I，此检查点将于试剂空白数据进行比较，借以判断试剂是否有问题。但此法仅在下降速率法和IMA方法中使用。如果不使用，则填写0。

当然，在速率法当中，也可以选择底物耗尽监测而增加的主读点M.DET.P.l。

图5 RRA速率法示意图

2PA反应方法：也就是常说的两点速率法。也是速率法的变种，区别在于不进行主读点间的两个点的线性监测。其余与速率法完全一样。

图6 2PA两点法示意图

CRA反应方法：官方说法为随着时间的变化反应接近恒定，曲线由最小二乘法拟合，也有称为固定点法。大致意思是选择读点区的两个点进行吸光度值得最小二乘法计算。是根据时间和吸光度的数值进行计算的，无论是速率法还是终点法均可采用。

当子读点被采用时，p=r≠0，或p≠0，r=0时，是速率法，速率计算是根据两点间曲线的正切线；当p

说实话，真不知道这个方法是做什么项目的，中文没有解释，英文的解释很少，也没发现实例。

图7 CRP固定点法示意图

IMA反应方法：也就是免疫比浊法。是采用最小二乘法计算的速率法。对于R1的加入量太少，无法进行E2计算时，这个方法就变得有用了。

也就是说，在很多免疫比浊项目里，R1的加入量往往小于R2的量，所以引发了一系列的计算和判别上的困难，IMA就是为了解决这个难题的。

样本和第一试剂加入量太少，就无法进行E2的计算，没有E2就无法进行前带监测和底物耗尽的监测，所以在 IMA方法中R2之后插入监测点Check D.P.I,用于弥补R1和S的不足。

采用IMA方法设置检查点后，系统自动计算limit values值（设备默认0.003），此法对浑浊样本的处理很有成效，所以用在免疫比浊项目上。

图8 IMA免疫比浊法示意图

图9 IMA应用示意图

IMA的其它使用方法与速率法一样，仅限于R1+S低于反应杯最小容量的测试项目里。如果不存在这样的项目，那么即便是免疫比浊项目，也应该采用常规速率法或终点法。

定标方法：因数定标、线性定标和非线性定标；

在参数界面里的Calc mthd，也就是计算方式里，有ABS和STD/MSTD选择，表示吸光度和单点定标/多点定标计算。在ADVIA的所有机型里，定标中的零浓度点用试剂空白替代，所以在定标之前要做试剂空白，如果不做试剂空白，仪器会认为试剂空白就是原点。注意这个差别，与奥林巴斯的不同。奥林巴斯的试剂空白和零浓度校准点是两个概念，而在adiva里合二为一。

参数界面里的Formula，也就是公式才是选择定标方法的地方。

因数定标：如果在Calc mthd里选择ABS，那就意味着你要采用因数定标，那么在Formula里只有一个可以选择，那就是Linear,因数定标只能用于线性定标。

因数定标也就是直线方程里的Y=KX+B中的K，所以也叫K值定标法。而B的确定则需要试剂空白，所以因数定标法必须做试剂空白，然后结合给出的K值进行定标曲线的绘制，然后依据这个曲线进行浓度计算。在Advia中，K值的给出是在参数界面的Standards setting中的FV中。

线性定标：线性定标需要两个点才能决定一条直线，我们一般给出一个零浓度点，一个带有浓度的标准点，这样仪器就会自动进行计算。而Advia中零浓度点在试剂空白里给出了，所以对于两点线性定标来说，只需要在给出一个校准点就可以了。所以在Advia的手册里，线性定标叫做一点线性。而且Advia的所有校准点，无论是线性还是非线性，零浓度点都不计算在内，只数带有浓度的校准点，比如5点定标，加上零浓度点其实就是6点；而6点定标，加上零浓度点就是7点。

不过，要指出的是，Advia的试剂空白并不是强制性的，这一点与奥林巴斯不同。不进行试剂空白检查的项目，默认试剂空白也就是零浓度点的值是通过原点的。

下面给出两张图，一张做过试剂空白的线性定标，一张是没有做过试剂空白的线性定标。

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