专题八 生物技术实践 第1讲 微生物的利用和生物技术在食品(7)

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9．(8分)(2011·济南二模，34)生产实践中应用的菌种主要来自土壤，从土壤中分离微生物的实验流程如下：

土壤取样―→选择培养―→梯度稀释―→鉴别培养。

请回答下列有关问题：

(1)将土壤浸出液接种到特定培养基上，可以将酵母菌从混杂的微生物群体中分离出来， 获得纯种酵母菌，这一过程叫做________。在培养酵母菌的过程中，对培养基、接种环 常采用的灭菌方法分别是________________。

(2)在使用酵母菌发酵生产酒精的过程中，影响酵母菌酒精发酵的主要因素有_________， 常使用________的方法从发酵液中提取纯酒精。

(3)从土壤中分离纤维素分解菌，最好选择在________环境中采集土样，所选择的培养基 应以________作为唯一碳源。

(4)纤维素分解菌能够合成纤维素酶，为了使纤维素酶反复使用，可以对纤维素酶进行 ________处理，处理的方法有吸附法、共价键结合法和________法。

解析 (1)在微生物培养过程中，培养基常用高压蒸汽灭菌，接种环常用灼烧灭菌。(2) 温度、pH影响酶的活性，氧气浓度影响发酵产物。因酒精沸点较低，故可用蒸馏法对酒 精进行提纯。(3)纤维素分解菌生活在富含纤维素的环境中，分离所用的培养基应以纤维 素作为唯一碳源，以抑制以其他有机碳为碳源的菌类生长。(4)对酶进行固定化处理可以 使酶重复使用，提高利用率。

答案 (1)纯培养 高压蒸汽灭菌、灼烧 (2)温度、pH、氧气浓度等 蒸馏 (3)富含纤 维素的 纤维素 (4)固定化 包埋

10．(12分)自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是对大肠杆菌进行数量测定的实验，请回答有关问题。步骤如下：

(1)制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。

(2)为了得到更加准确的结果，你选用________________(平板划线法、稀释混合平板法、 稀释涂布平板法)接种样品。

(3)适宜温度下培养。

结果分析：

①测定大肠杆菌数时，在对应稀释倍数为106的培养基中，得到以下几种统计结果，正 确可信的是 ( )。

A．一个平板，统计的菌落数是23

B．两个平板，统计的菌落数是22和26，取平均值24

C．三个平板，统计的菌落数分别是21、5和52，取平均值26

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