实验动物学课件总结
第一讲实验动物学绪论
一、当你定购实验动物时需要了解什么?
品种、品系? 近交系、封闭群?级别? 包装?年龄、体重?性别? 二、实验动物是生命科学研究必备的四大支撑条件之一(AEIR)
A-- Animal 实验动物 E—Equipment 设备 I—Information 信息 R—Reagent 试剂 三、实验动物的定义
#实验动物(Laboratory Animal)是指经人工培育的、遗传背景清楚、对其携带的微生物和寄生虫实行控制、用于科学实验、教学、检定、药品、生物制品生产的动物。
四、实验用动物(Experiment Animal)与实验动物(Laboratory Animal)是不同的。 五、实验动物科学(Laboratory Animal Science)
实验动物学是研究实验动物及其应用的科学。它是以生物学、动物科学、动物医学、医学、药理学、毒理学等学科为基础,综合发展而形成的一门覆盖面极广的科学。 六、实验动物科学的内容包括实验动物、实验动物医学、比较医学、动物实验
七、#实验动物学研究的主要内容包括实验动物遗传育种(Laboratory animal genetic breeding science)、实验动物微生物与寄生虫学(Laboratory animal microbiology and parasitology)、实验动物环境生态学(Laboratory animal environmental ecology)和实验动物营养学(Laboratory animal nutriology)。
八、实验动物科学发展简史
1.1909年,Prof.Little采用近交方法培育出首个近交系小鼠DBA;
2.1943年,美国Dr.Reynier研制出第一台金属隔离器,饲养无菌大鼠;
3.1948年,美国成立实验动物管理小组,后又成立实验动物科学学会(AALAS); 4.1966年,美国国会批准《实验动物福利法案》; 5.1982年,第一例转基因小鼠问世;
6.实验动物学、比较医学等专业的设立及建立相应培训制度。 九、我国实验动物科学发展概况
1.1918年 原北平中央防疫处开始饲养小鼠 2.1946年 从印度引入小鼠
3.50年代,开始建立实验动物专业队伍
4.1956年 天津医学院李漪教授培育出津白1低癌系小鼠,63年又培育出津白2高癌系小鼠 5.1961年 615小鼠培育成功
6.1987年,中国实验动物学会成立
7.1988年,国家科委发布《实验动物管理条例》 8.1996年10月,《北京市实验动物管理条例》出台 十、实验动物科学发展趋势
1.基因修饰技术运用2.实验动物福利3.“3R”原则4.实验动物商品化、社会化5.SPF动物广泛应用
十一、实验动物伦理是是人与实验动物关系的伦理信念、道德态度和行为规范。主要体现在尊重实验动物的价值和权利。 十二、实验动物伦理学发展的原因
1.人类道德进步及文明程度提高,呼吁善待实验动物;
2.人为原因造成野生动物等的快速灭绝,引起人们忧虑,激发人们探究人在自然中的位置、动物的角色,人与动物之间的关系等问题;
3.虐待动物现象随处可见,引发反对虐待动物的动物福利和动物权利运动,而动物福利与动
物权利运动需加以理论指导。 十三、实验动物福利——实验动物福利属于实验动物伦理的范围。指实验动物的一种康乐状态。在此状态下,其基本需求得到满足,而痛苦被减至最小。(“动物福利”(Animal Welfare)最初由休斯于1976年提出,是指饲养农场中的动物与其环境协调一致的精神和生理完全健康的状态)
十四、实验动物的五项基本福利
1. 提供适当的清洁饮水和保持健康和精力所需要的食物,使动物不受饥渴之苦; 2. 提供适当的栖息场所,能够舒适地休息和睡眠,使动物不受困顿不适之苦; 3. 做好防疫,预防疾病和给患病动物及时诊治,使动物不受疼痛、伤病之苦; 4. 保证拥有良好的条件和处置(包括安乐死),使动物不受恐惧和精神上的痛苦;
5. 提供足够的空间、适当的设施以及与同类动物伙伴在一起,使动物能够自由表达正常的
习性。
十五、动物实验需要考虑实验动物伦理的几个环节 1.实验目的确定和必要性评估2.实验设计遵循3Rs原则 3.实验操作过程避免或减轻动物疼痛及恐惧 4.日常饲养及护理5.安乐死
十六、科技部文件《关于善待动物的指导性意见》(2006年)
十七、2006年被北京大学医学部文件:关于在北京大学医学部伦理委员会内增设实验动物福利伦理委员分会的通知。后北京大学医学部伦理委员会更名为北京大学生物医学委员会。 十八、CRO: Contract Research Organization Include: Clinical trial and Preclinical research 十九、AAALAC认证(国际实验动物管理评估和认证协会)软件要求、硬件要求 二十、AAALAC accredits your entire “program” which includes: 1.animal care and use policies and responsibilities 2.animal environment, housing and management 3.veterinary medical care
4.your physical plant(设施设备条件)
二十一、实验动物科学部(工作宗旨)——一个中心,两个确保
以为教学和科研工作服务为中心,确保提供优质足量的实验动物、确保提供全方位的动物实验服务。
二十二、实验动物科学部(主要工作) 1.SPF/VAF级实验动物生产供应
2. 协助各教研室及附属医院等单位进行动物实验,给予全面的实验期实验动物的饲养管理及动物实验技术服务
3.以合同形式独立承担并完成有关毒理学、药理学、肿瘤学、病理生理学等方面的动物实验工作
4.国内、外新引进实验动物的隔离检疫,保种等相关服务 5. 实验动物净化升级工作
6.研究生教学和对实验动物与动物实验相关人员的上岗证培训工作
二十三、GAP: Good Animal Practice CCAC: Canadian Council on Animal Care 二十四、实验动物的分类
1.传统的动物学分类方法2.按动物的种和大小分类3..按微生物控制程度分类4.按遗传学原理分类
第二讲实验动物遗传学控制
一、实验动物按遗传学控制分类:近交系、封闭群(远交群)、杂交群 二、近交系(Inbred Strain)定义
经连续20代以上的全同胞兄妹交配或亲子交配,近交系数大于99%,品系内所有个体都可以追溯到第20代或以后代数的一对共同祖先。
(近交系数指群体中某个体通过遗传携带两个同源等位基因的概率) 三、近交系的命名
一般以大写英文字母或大写英文字母加阿拉伯数字命名。 BALB ,DBA,TA1, C3H等。一些历史较长,已经广泛使用并获得认可的品系除外,如129等。 四、亚系(Subtrain)定义
由同一个近交系分离出来的有不同特性的分支,这些分支间有遗传差异,称为该品系的亚系。
五、亚系的形成
1.兄妹交配20-40代时形成的分支,主要原因是残留杂合; 2.某分支与其他分支分开繁殖超过100代,主要原因是突变;
3.发现一个分支与其他分支的差异,原因是残留杂合、突变或者是遗传污染。 六、亚系的命名
在品系名称后加一道斜线(/),斜线后标明亚系的符号,亚系的符号可以是以下三种: 1.数字,如DBA/1、DBA/2等。
2.培育或产生亚系的单位或人的缩写英文名称,第一个字母用大写,以后的字母用小写。使用缩写英文名称应注意不要和已公布过的名称重复。例如:A/He,表示A近交系的Heston亚系;CBA/J,表示由Jackson保持的CBA近交系的亚系。 3.当一个保持者保持的一个近交系具有两个以上的亚系时,可在数字后再加保持者的缩写英文名称来表示亚系。如:C57BL/6J,C57BL/10J分别表示由美国杰克逊研究所保持的C57BL近交系的两个亚系。 例外情况:
作为以上命名方法的例外情况是一些建立及命名较早,并为人们所熟知的近交系,亚系名称可用小写英文字母表示,如BALB/c、C57BR/cd等。
由于遗传污染形成的亚系,通常与原品系之间遗传差异较大,因此对这样形成的亚系应重新命名。例如由GLaxo保持的A近交系在发生遗传污染后,重新命名为A2G。 七、近交系的主要特征
1.基因位点的纯合性2.遗传组成的同源性3.表型的一致性4.长期遗传的稳定性 5.遗传特征的可分辨性6.背景资料的完整性
由于近交系动物个体具有相同的遗传组成和特性,因而对实验反应极为一致,只需用少量的动物,即可得到非常规律的实验结果;动物个体之间组织相容性抗原一致,异体移植不产生排斥反应;每个近交系都有各自鲜明的生物学特点。 八、近交系的名称缩写
近交系名称 缩写名称 C57BL/6 → B6 BALB/c → C DBA/2 → D2 C3H → C3
九 近交系名称中常见的缩写符号
1.f (foster nursing): 代乳2.o (ovary): 卵巢移植
3.p: 表示移植的胚胎经过冷冻处理4.e (egg): 受精卵转输
5.BR: Barrier Reared6.CRL: Charles River Laboratories 7.CRJ: Charles River Japan 十、常用的亚系符号
1.N或NIH: 美国国立卫生研究院 2.J 或 Jax: The Jackson Laboratory 3.He: 美国NCI的W. E. Heston博士 4.An: 美国国立肿瘤研究所(NCI) 5.Jie: 日本实验动物中央研究所 6.Ola: 英国牛津郡实验动物场 十一、近交系动物命名实例 DBA/1fC57BL/6J 中
①DBA: 小鼠品系名②1 :亚系名③f :表示代乳 ④C57BL: 代乳母鼠品系名⑤6:亚系⑥J:亚系名 十二、特殊类型的近交系
1.重组近交系(Recombinant Inbred Strain)简称RI
定义:由两个近交系杂交后,经连续20代以上兄妹交配育成的近交系。 命名:由两个亲代近交系的缩写名称中间加大写英文字母X。 2.重组同类系(Recombinant Congenic Strain)简称RC
定义:由两个近交系杂交后,子代与两个亲代中的一个进行数次回交(通常2次),通过不对特殊基因进行选择的近亲交配而育成的近交系。 命名:两个亲代近交系缩写名称中间加小写字母c。 3.同源突变系(Coisogenic Inbred strain)
定义:两个近交系,除了一个指明位点等位基因不同外,其遗传基因全部相同的品系。 命名:由发生突变的近交系名称后加突变基因符号(用英文斜体印刷体),二者之间以连接号分开。如:DBA/Ha-D
4.同源导入系(Congenic Inbred Strain)
定义:通过杂交、互交或回交等方式将一个基因导入到近交系中,所形成的新的近交系只在一个很小的染色体片段上的基因不同,也称同类系。 命名:由以下三部分组成: a.接受导入近交系缩写名称;b.提供导入基因的近交系缩写名称并与a之间用英文句号分开;c.导入基因符号(英文斜体),与b之间用连字符分开。如:B10.129-H-12b,表示该同类系背景为C57BL/10,导入基因为H-12b,基因提供者为129。 十三、封闭群(Closed Colony)定义
以非近亲交配方式进行繁殖生产的实验动物种群,在不从外部引入新个体的条件下,至少连续繁殖4代以上,称为一个封闭群,或叫远交群。 十四、封闭群的命名
封闭群由2-4个大写英文字母命名,种群名称前标明保持者的英文缩写名称,第一个字母须大写,后面字母小写,一般不超过4个字母。保持者名称与种群名称之间用冒号分开。 把保持者的缩写名称放在种群名称的前面,二者之间用冒号分开,是封闭群动物与近交系动物命名中最显著的区别。
例如N:NIH 是由美国卫生研究院(N)保持的NIH封闭群小鼠
Lac:LACA 是由英国实验动物中心(Lac)保持的 LACA封闭群小鼠
某些命名较早,又广为人知的封闭群动物,名称与上述规则不一致时,仍可沿用其原来的名称。如:Wistar大鼠,日本的ddy小鼠等。近交系命名规则中的一些符号也适用于封闭群动物的命名 。
十五、封闭群动物的特点 1.遗传组成具有很高的杂合性
2.具有类似于人类群体遗传异质性的遗传组成 3.具有较强的繁殖力、生活力和抵抗力
4.突变种所携带的突变基因通常导致动物在某方面的异常,从而成为生命科学研究的模型。 十六、杂交群(Hybrids)定义
由不同品系或种群之间杂交产生的后代。
杂交一代动物(F1代):两个不同近交系或种群杂交所生的第一代动物。 十七、杂交群的命名
雌性亲代名称在前,雄性亲代名称居后,二者之间以大写英文字母“X”相连,将以上部分用括号括起,再在其后标明杂交的代数(如F1、F2等)。品系或种群的名称可使用通用的缩写名称。
例如:(C57BL/6XDBA/2)F1 = B6D2F1
表示以C57BL/6为母系, DBA/2为父系杂交后生育的杂交一代,可简写为B6D2F1 十八、F1动物的特征和应用 1.遗传和表型上的一致性:表型变异率低,对周围环境变化适应性较强,实验反应高度均一; 2.杂交优势:具较强的生命力和对疾病的抵抗能力,寿命较长,适合于保存某些有害基因和长期慢性致死实验,也可作为代乳动物以及卵、胚胎和卵巢移植的受体;
3.杂合的遗传组成:同时具有两个亲本品系的特点,可接受两个亲本品系的细胞、组织、器官和肿瘤移植。
十九、如何保持实验动物遗传稳定 1.严格的繁育制度
2.按期进行遗传监测(遗传监测的主要方法包括毛色基因测试法、生化标记基因检测法、下颌骨测定法、皮肤移植法) 第三讲主要实验动物介绍 一、介绍的主要实验动物包括
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1.封闭群大鼠 (OUTBRED RATS):如CD(SD)IGS 大鼠和WISTAR 大鼠
2.近交系大鼠 (INBRED RATS):如LEWIS 大鼠、SHR 大鼠、F344 大鼠、 Brown Norway 大鼠
3.封闭群小鼠 (OUTBRED MICE):如CD-1小鼠 4.近交系小鼠 (INBRED MICE):如BALB/C AnN 小鼠、C3H/He小鼠、C57BL/6N小鼠 、DBA/2N 小鼠 、FVB/N 小鼠 、129 小鼠 、 SJL 小鼠
5.免疫缺陷小鼠(Immunodeficient Mice):如BLAB/c裸鼠、Nu/Nu裸鼠、SCID BEIGE小鼠 6.叙利亚金黄地鼠(Golden Syrian Hamsters) 7.Hartley豚鼠(Hartley Guinea Pigs) 8.Marshall 比格犬
二、封闭群大鼠的主要品种介绍
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1.CDIGS大鼠 (SD大鼠) 命名:Crl:CD(SD)IGS BR 起源:1925年Robert W.Dawley 由一只杂种的雄性和一只雌性 Wistar大鼠交配得到。1950年从Sprague Dawley 引入CRL。1955年由最初的Charles River SDTM剖腹产形成现在CD的核心群。IGS表示CD大鼠是使用CRL国际遗传标准(IGS: International Genetic Standard) 系统繁育的。1999年从CRL引入维通利华。 毛色:白化。
特性和用途:产仔多生长发育快,抗病能力强。自发肿瘤率低。对性激素感受性高。常用作营养学、内分泌学和毒理学等方面的研究。是国际通用的标准动物。
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