DRR041A(SYBR)TAKARA说明书(3)

●制品说明

本制品是采用SYBR® Green I嵌合荧光法进行Real Time PCR的专用试剂。含有Real Time PCR反应检测用的最适浓度SYBR® Green I，是一种2×Premix Type试剂，进行实验时，PCR反应液的配制十分方便简单。

制品中使用了抗Taq抗体的的Hot Start法用 DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS和Real Time PCR用最适Buffer组合，可以有效抑制非特异性的PCR扩增，大大提高PCR的扩增效率，进行高灵敏度的Real Time PCR扩增反应。

本制品适合于快速Real Time PCR扩增反应，可以在宽广的定量区域内得到良好的标准曲线，对靶基因进行准确定量、检测，重复性好，可信度高。

●制品内容（50 μl反应×200次）

●适用的Real Time PCR扩增仪

SYBR® Premix Ex TaqTM（Perfect Real Time）（2×Conc.）*1 1.0 ml ×5支 ROX Reference Dye（50×Conc.）*2 200 μl ×1支 ROX Reference Dye II（50×Conc.）*2 200 μl ×1支 *1 内含TaKaRa Ex Taq HS，dNTP Mixture，Mg2+，SYBR® Green I等。

*2 只使用在ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR扩增仪上，用以校正孔与孔

之间产生的荧光信号误差。使用ABI PRISM 7000/7700/7900HT和7300 Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye，7500 Real-Time PCR System和7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II， Stratagene公司的Mx3000P也适用ROX Reference Dye II。Thermal Cycler Dice Real Time System、LightCycler、Smart Cycler System等Real Time PCR扩增仪时不必使用。

Thermal Cycler Dice® Real Time System（TaKaRa）

ABI PRISM® 7000/7700/7900HT，7300/7500 Real-Time PCR System，7500 Fast Real-Time PCR System（Applied Biosystems） LightCycler®（Roche Diagnostics） Smart Cycler® System（Cepheid） Mx3000PTM（Stratagene） 其他各种Real Time PCR扩增仪

●保 存

●试剂盒原理

4℃避光保存，避免冻结制品。-20℃反复冻融制品性能可能下降，请避免-20℃保存制品。

本制品使用了改良后的TaKaRa Ex Taq HS进行PCR扩增，通过检测反应液中SYBR Green I的荧光强度，达到监控PCR产物扩增量的目的。

1． 本制品中的DNA聚合酶使用了改良后的TaKaRa Ex Taq HS，并结合TaKaRa独自开发的Buffer

系统，可以有效抑制非特异性PCR扩增，大大提高PCR扩增灵敏度。 2． 嵌合荧光检测法。

SYBR® Green I与双链DNA结合后发出荧光，所以可以通过检测反应体系中的SYBR® Green I荧光强度，达到检测PCR产物扩增量的目的。

具体原理见下图。通过PCR反应生成双链DNA，SYBR® Green I与双链DNA结合发出荧光，通过检测PCR反应液中的荧光信号强度，可以对目的基因进行准确定量，同时还可以测定扩增的目的DNA片段的融解温度。

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