细胞生物学(翟中和)笔记(9)

细胞生物学(翟中和)笔记

?间接免疫荧光标记技术

?在光镜水平用于特异蛋白质

等生物大分子的定性定位：

如绿色荧光蛋白(GFP)的应用

激光共焦扫描显微镜技术

（Laser Scanning Confocal Microscopy）

?原理

?应用：

排除焦平面以外光的干扰，增强

图像反差和提高分辨率(1.4—1.7)，

可重构样品的三维结构。

?相差显微镜（phase-contrast microscope）

将光程差或相位差转换成振幅差，可用于观察活细胞

?微分干涉显微镜（differential-interference microscope）

偏振光经合成后，使样品中厚度上的微小区别转化成

明暗区别，增加了样品反差且具有立体感。适于研究

活细胞中较大的细胞器

?录像增差显微镜技术（video-enhance microscopy）

计算机辅助的DIC显微镜可在高分辨率下研究活

细胞中的颗粒及细胞器的运动

电镜与光镜的比较

主要电镜制样技术

? 超薄切片技术 用于电镜观察的样本制备示意图

?负染色技术（Negative staining）与金属投影

染色背景，衬托出样品的精细结构

?冰冻蚀刻技术（Freeze etching） （技术示意图）

冰冻断裂与蚀刻复型：主要用来观察膜断裂面的蛋白质颗粒

和膜表面结构。

快速冷冻深度蚀刻技术（quick freeze deep etching）

?电镜三维重构技术

电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的

具有重要应用前景的一门新技术。

电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振

分析技术相结合，是当前结构生物学（Structural Biology）

——主要研究生物大分子空间结构及其相互关系的主要实验手段。

?

扫描电镜

?原理与应用：

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