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细胞生物学(翟中和)笔记(11)

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细胞生物学(翟中和)笔记

?实现对细胞内生物大分子进行动态和追踪研究。

?步骤:

?前体物掺入细胞(标记:持续标记和脉冲标记)

———放射自显影

六.定量细胞化学分析技术

? 细胞显微分光光度术(Microspectrophotometry)

?利用细胞内某些物质对特异光谱的吸收,测定这些物质

(如核酸与蛋白质等)在细胞内的含量。

包括:

紫外光显微分光光度测定法

可见光显微分光光度测定法

? 流式细胞仪(Flow Cytometry)

?主要应用:

用于定量测定细胞中的DNA、RNA或某一特异蛋白的含量;

测定细胞群体中不同时相细胞的数量;

从细胞群体中分离某些特异染色的细胞;

分离DNA含量不同的中期染色体。

一、细胞的培养

?动物细胞培养

? 类型:原代培养细胞(primary culture cell)

继代培养细胞(sub-culture cell)

? 细胞株(cell strain) 正常二倍体,接触抑制

? 细胞系(cell line) 亚二倍体,接触抑制丧失

?植物细胞

?类型: 原生质体培养 (体细胞培养)

单倍体细胞培养(花药培养)

? 非细胞体系(cell-free system)

二、细胞工程

?细胞融合(cell fusion)与细胞杂交(cell hybridization)技术

?单克隆抗体(monoclone antibody)技术 图

?细胞拆合与显微操作技术

?物理法结合显微操作技术(图1、图2)

?化学法结合离心技术

?制备核体(karyoplast)和胞质体(cytoplast)。

?其它技术

遗传分析(mutant, knock out, knock in)

对细胞生命活动的研究成为当今生命科学发展的瓶颈

对细胞生命活动的研究成为当今生命科学发展的瓶颈

第四章 细胞质膜与细胞表面

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