生物下游技术试题(6)

1．化学性劣化2．物理性劣化3．生物性劣化，

（二）水生物（附生）污垢

由于形成吸着层和堵塞等外因而引起膜性能变化。

防止污染应根据产生的原因不同，使用不同的方法。

（1）预处理法（2）开发抗污染的膜（3）加大供给液的流速

3. 离子交换层析分辨率及影响分辨率因素？

层析分离常采用分辨率（RS）来描述两种物质之间分离效果的好坏。分辨率定义为两个洗脱峰峰顶对映的洗脱体积之差比上两峰在基线上峰宽的和的平均值。

分离两种物质时分辨率取决于这两种组分的洗脱体积和峰宽。

而决定组分洗脱体积和峰宽的因素包括两种组分的分子大小，

凝胶柱的选择性和柱效。

4. 理想凝胶过滤介质应具备的条件。

（1）有较强的机械稳定性，能满足层析过程所需流速，在其标称的操作压力范围内不发生体积变化；

（2）高化学稳定性，凝胶颗粒对分离过程中常用的试剂和样品都保持惰性，在很宽的pH范围内保持稳定，耐去污剂、有机溶剂，耐高温，从而方便清洗和消毒灭菌；

（3）球形，颗粒直径均匀，呈现亲水性；

（4）不带电荷，不对样品产生吸附作用。

5. 亲和吸附剂的制备过程。

1）选择合适的配体；

2）选择合适的载体和连接臂；

3）用合适的方法将配体化学偶联到载体上；

4）封闭偶联载体上的裸露活化基团；

5）估计并储存亲和吸附剂。

四. 论述题（每小题15分，共15分）

请根据下游技术的一般工艺过程及它们的主要技术特点设计一套经济的且技术可行的提取纯化方案。（至少要涉及三种技术）

发酵液 提取 原材料：酵母 处理对象：酵母蔗糖酶

第一步：离心要沉淀。

第二步：破碎细胞。因为酵母蔗糖酶是胞内产物，所以要破碎细胞把酵母蔗糖酶释放出来，采用氨解法。 第三步：用氨解法抽提粗酶还含有大量杂质，需要进一步分离纯化，采用有机溶剂乙醇沉淀。

第四步：乙醇分级后的蔗糖酶仍含有许多杂质，这时用一些层析技术，如离子交换层析。

最后检测蔗糖酶纯度和得率。

Rs Ve2 Ve1(Wb1 Wb2)/2

2010-2011学年第一学期《生物工程下游技术》试题（A卷）答案

二、选择题（将正确的答案写在横线上，可选的答案个数不固定，每题全对3分，共30分）

1. 下游技术的生物原料可以是( ABCD )

A. 生物界自然产生的 B. 酶反应获得的

C. 动植物细胞组织培养的 D. 微生物菌体发酵的

2. 细胞浓度的直接测量方法有 ( ABCD )

A. 细胞干重法 B. 显微计数法 C. 平板计数法 D. 浊度法

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