生物下游技术试题(13)

离心分离 低速、高速、超速（差速离心、密度梯度）离心分离技术等 1分 膜分离技术 透析、微滤、超滤、纳滤、反渗透等 1分 分类清楚1分

4. 色谱装置主要包括哪几部分及它们的作用。

由高压输液系统、进样系统、分离系统、检测系统等四大部分组成。 1分

一、高压输液系统

高压输液系统由 溶剂贮存器、高压泵、梯度洗脱装置和压力表等组成。

1.溶剂贮存器 溶剂贮存器一般由玻璃、不锈钢或氟塑料制成，容量为1-2 L，用来贮存足够数量、符合要求的流动相。

2.高压输液泵 其功能是将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连续不断地送入液路系统，使样品在色谱柱中完成分离过程。由于液相色谱仪所用色谱柱径较细，所填固定相粒度很小，因此，对流动相的阻力较大，为了使流动相能较快地流过.

3. 梯度洗脱装置 梯度洗脱就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例，从而使流动相的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化，达到提高分离效果，缩短分析时间的目的。 2分

二、进样系统

进样系统包括进样口、注射器和进样阀等，它的作用是把分析试样有效地送入色谱柱上进行分离。1分

三、分离系统

分离系统包括色谱柱、恒温器和连接管等部件。主要作用是分离样品的。 1分

四、检测器

检测器是液相色谱仪的关键部件之一。对检测器的要求是：灵敏度高，重复性好、线性范围宽、死体积小以及对温度和流量的变化不敏感等。 1分

5.动物细胞培养生物反应器有哪些，在设计上要考虑哪些因素。

①气升式细胞培养生物反应器

气升式生物反应器产生的湍流温和而均匀，剪切力相当小，反应器内没有机械运动部件，因而细胞损伤率比较低；同时由于采用直接喷射空气供氧，氧传递速率高；液体循环量大，能使细胞和营养成分均匀地分布于培养基中。 2分

②中空纤维管生物反应器

中空纤维培养技术的优点是无剪切、高传质、营养成分的选择性渗入, 使培养细胞和产物密度都可达到比较高的水平。 2分

③通气搅拌反应器

避免向培养基直接通气时气泡损伤细胞，没有移动部件，密封好，氧转换率较高，便于放大。 1分 ④流化床生物反应器 1分 ⑤无泡沫搅拌生物反应器 1分

四. 实验设计题（每小题5分，共10分）

1．大蒜SOD酶分离纯化路线？

大蒜破壁-----离心------盐析-------透析-------凝胶过滤 每种方法1分

2．蛋白质样品含量少溶液和含高盐蛋白质样品溶液，设计纯化色谱方案？

蛋白质样品含量少溶液 IEF/AFC----HIC/无-----SEC 3分

含高盐蛋白质样品溶液 SEC--- IEF/AFC---- SEC 3分

五．论述题（每小题10分，共20分）

1．论述蛋白质分子量的测定方法有哪些？如何测定？

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