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系部 病原生物学与医学免疫学系 教师姓名 课程 医学微生物学与专业 年 名称 免疫学 层次 级 授课 授课 学实验 4 方式 时间 时 授课题目:实验一 微生物学基础实验(一) 目的要求: 掌握:显微镜油镜的使用和保养;细菌的基本形态及其特殊结构观察方法;细菌的分离培养技术;细菌鉴定常用的生化反应的原理及结果观察;药敏试验(纸片扩散法)的原理,方法。 熟悉:医学微生物学与免疫学实验的目的和要求;医学微生物学实验室规则和应急防护措施。 了解:培养基的概念、基本成份、制备过程、种类及用途;细菌的纯种培养技术以及不同种类培养基接种法。 重点难点: 细菌的分离培养技术;细菌鉴定常用的生化反应的原理及结果观察;细菌在培养基上生长情况的观察。 教具与课件: PPT课件 作业:见课件 课后回忆(经验教训、效果估计或反应,存在问题……): 系主任 201 年 月 日
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教学内容与组织安排: 课堂时间安排:讲授60min,示教操作30min,学生操作70min。 一、介绍实验室规则(P2) 二、光学显微镜油镜的使用和保护法(操作-1台镜/人)(P19) 1.油镜头的识别 2.油镜的使用法 3.油镜头使用后的维护 三、细菌基本形态和特殊结构的观察(P23) 基本形态:大肠杆菌、葡萄球菌、霍乱弧菌---革兰染色 特殊结构:破伤风梭菌(芽胞染色)、肺炎球菌(荚膜染色)、变形杆菌(鞭毛染色) 观察时注意细菌的形态、排列方式及染色性。 四、常用培养基的介绍(示教)(P24) 常用培养基按物理性状分为固体培养基、液体培养基及半固体培养基;按用途分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基等。 对照实物,讲成分、用途。 五、细菌的接种技术和培养方法(P25) 1、分离培养接种法――平板分区划线法(操作:1份/人)(示教操作) 菌种:大肠杆菌和金黄色葡萄球菌混合液。 讲目的、原理、方法、意义。 操作注意事项:划线紧密、不能重叠、不能划破琼脂表面、无菌操作、接种后标记及放置。 2、纯种细菌接种法(示教操作) 包括:固体斜面培养基、液体培养基、半固体培养基接种法。 注意事项:正确的接种方法 六、细菌的生化反应(示教结果)(P30) 1、单糖发酵试验: 菌种:大肠杆菌、伤寒杆菌。 养基:乳糖、葡萄糖液体发酵管。 2、吲哚(靛基质)试验 菌种:大肠杆菌 、产气杆菌。 培养基:蛋白胨水培养基。 3、硫化氢试验 菌种:大肠杆菌、变形杆菌。 培养基:醋酸铅培养基。
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4、细菌色素的产生 菌种:绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌。 培养基:普通琼脂平板。 讲各生化反应的原理、实验方法、结果观赛,在细菌鉴别中的意义。 七、药敏试验—纸片扩散法(操作:1皿/4人)(示教操作)(P37) 菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌培养物。 培养基:普通琼脂平板。 药敏纸片一套(青霉素、四环素、庆大霉素、磺胺、链霉素) 注意事项:接种细菌:密集均匀、标记菌种;放置药敏纸片:字母、相互间距离;标记班级、组号。 作业: 1、绘图:细菌的基本形态(球、杆、弧菌)及细菌的特殊结构(芽孢、荚膜、鞭毛)。 2、记录细菌生化反应的各项试验结果。
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系部病原生物学与医学免疫学系 教师姓名 课程 医学微生物学与名称 授课 方式 免疫学 实验 专业 层次 授课 时间 年级 学时 4 授课题目:实验二 微生物学基础实验(二) 目的要求: 掌握:细菌的致病性(细菌表面结构、侵袭性酶及内、外毒素的致病作用);细菌涂片的制备方法,革兰染色的步骤、结果、意义;药敏试验(纸片扩散法)的原理、结果分析及意义。 熟悉:不同细菌在各种培养基上生长情况的观察要点。 了解:实验室常用灭菌器的使用方法。 重点难点: 细菌涂片的制备及革兰氏染色方法。细菌在各种培养基上生长情况的观察。 教具与课件: PPT课件 课外作业:见课件 课后回忆(经验教训、效果估计或反应,存在问题……): 系主任 201 年 月 日
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教学内容与组织安排: 课堂时间安排:看电教片及讲授60min,示教操作20min,学生操作80min。 一、细菌的致病性――电教片:(P ) 1、破伤风外毒素毒性试验(12分) 2、伤寒杆菌内毒素毒性试验(14分) 二、细菌在培养基上生长情况的观察(示教结果,P25) (一)细菌在固体琼脂平板上生长情况的观察 1、普通琼脂平板:金葡球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、变形杆菌(迁徙现象)的培养物。学生上次实验课自己接种的平板(混合菌液)。 注意观察各种细菌在普通平板上菌落的大小、形态、颜色、透明度、表面、边缘、有无迁徙生长现象。 2、血平板:金葡球菌和柠葡球菌的培养物。 观察要点:菌落的大小、形状、颜色、表面、边缘、透明度、溶血性、迁徙生长现象。 (二)细菌在固体斜面上生长情况的的观察:柠葡斜面培养物。 观察要点:菌苔的颜色、湿润度等。 (三)细菌在液体培养基上生长情况的观察:枯草杆菌、大肠杆菌或葡萄球菌、链球菌的肉汤培养物; 注意观察三种生长现象:混浊生长、沉淀生长、菌膜生长。 (四)细菌在半固体培养基上细菌生长情况的观察:大肠杆菌和金葡球菌的培养物。 观察要点:穿刺线的情况(穿刺线周围是否清晰,或在穿刺线周围呈行刺状或云雾状)。 三、细菌的染色检查法-革兰染色法(操作,1份/人)(P21) ?材料?学生上次实验课自己接种的平板(金黄色葡萄球菌和大肠杆菌混合菌液培养物)、革兰染色液、生理盐水、载玻片、接种环等。 ?方法? 1、细菌涂片的制备: 使用学生上次课分区划线的结果(金葡球菌和大肠杆菌混合菌液的培养物),分别挑取两种不同类型的菌落制备细菌涂片。 涂片 自然干燥 固定 2、革兰染色:分析革兰染色的关键步骤、结果及实际意义(鉴别细菌、指导用药、了解细菌致病性)。
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