毕业设计正文（改完版）-李云浩(1) - 图文(3)

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各种色斑。目前应用于紫外线防护的物质大致分为两类：物理阻隔剂和化学吸收剂，这些物质可以通过化学合成如氧化锌，水杨酸酯等，也可在动植物体内天然提取如黄芩苷，芦丁，类菌孢素氨基酸，伪枝藻素等。地木耳中的抗辐射的色素类菌孢素和伪枝藻素含量在12%左右，含量也丰富。[7] 3.抗癌作用

文献报道称，根据对来自中国中西部荒漠地区存在的两种地木耳(Nostoocommune)进行研究，并对其生物活性物质简单地进行了筛选,初步对包括水、乙酸乙酯等为溶剂的粗提物进行试验，并且验证了其抗肿瘤的活性。[8]何松等人分别以肺癌A549和肝癌7721作为材料,并通过实验进行体外抗肿瘤活性检测发现,地木耳乙酸乙酯提取物对这两类癌细胞的细胞毒性效果最强，分别为每毫升24.79微克地木耳提取物和每毫升51.33微克地木耳提取物。而进一步实验证实乙酸乙醋相中含量比较高的成分有两类物质：分别是粗黄酮和粗多酚,而其含量分别为4.57%和12.06%；地木耳石油醚相的提取物中粗黄酮的含量比较大,约为6.75%。

利用硅胶柱层析对地木耳乙酸乙酷相提取物再次进行分离纯化,得到几个洗脱部分，其中第4部分表现出很高的抗肿瘤活性，而且其中的粗多酚及粗黄酮含量很高,分别达到21.30%和70.71%,这便说明地木耳的活性物质中的粗多酚及粗黄酮类物质可能是具有抗肿瘤作用。[9]

另外有报道指出，将地木耳的水提物配制成一定浓度的多糖溶液，可以对体外培养宫颈癌细胞的增殖及扩散有抑制作用，从而抑制癌细胞扩散。这种水提物通过蒽酮试剂定性试验，已经证明其属于地木耳粗多糖。并且通过水提法提取的地木耳多糖，其提取率占9%-12%左右。 4.抑菌作用

地木耳多糖对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌具有一定的抑制效果,且作用相当明显。但是都不如阳性对照品抗生素阿莫西林的抑菌效果强。随着多糖质量浓度的增大,抑制作用也逐渐增强；最小抑制浓度MIC在125-259μg/ml之间。地木耳对金黄色葡萄球菌的抑制作用表现的不明显。由此可见，在对这3种微生物的试验中，地木耳多糖对微生物的抑制作用是具有选择性的。[3] 2.1.4 食品领域

在我国许多省市地区, 地木耳（Nostoc commune）的利用方式是以食用型野菜营养资源为用途的。地木耳含有很多种类，比如氨基酸类、多肽蛋白质类、单

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糖以及多糖类、供人体利用的微量金属元素和少量的脂肪类、各种色素类, 成为氨基酸和纤维素丰富的来源之一。利用绿色保健的地木耳可以向保健功能性饮料或天然绿色食品方面研发, 例如以Nostoc commune为原料,按黄豆酱、米粉或者面粉、地木耳粉末一定的比例,辅以辣椒、麻椒等调味,便可以生产制作成风味地皮菜辣椒酱。 2.1.5 保护环境

资料显示地木耳生长区域广，易采集,成活的地木耳对大气污染也十分敏感,有研究表明，将地木耳挂袋暴露于空气中,选择地木耳的伤害面积、含硫量、PH值为主要监测指标,通过地木耳对大气污染的监测,同时以地区大气环境质量综合指数为参照,用模糊数学方法对大气环境质量作出综合评价。结果表明,地木耳的多指标模糊综合评判法与综合指数法一致,具有较高的可信度。杨学山等用荒漠藻地木耳挂袋法监测大气SO2污染,研究结果发现地木耳的含硫吸收量与大气SO2污染之间存在一定的相关性,该法有许多优点,可以把地木耳开发作为大气污染的监测器。

2.1.6 农林牧业

地木耳种属为固氮念珠藻类,既能合成固定氨从而使空气中的游离氮得到固定,又能进行固定二氧化碳的光合作用。在自然的条件下,地木耳可以与同种其他固氮藻类一样作为十分重要的分解者来为自然作物提供氮肥,可以开发成为一种新型的肥源。有些地区利用野生的地皮菜作肥料种地,比如说将其和所堆积的草皮一起混合作为堆肥，这样可以使地木耳中含有的生长促进剂作用在农作物上促进产量。有研究报道称多种农作物和花卉植物的生长在一定浓度的地木耳提取物的作用下，其生长可有明显的促进。有文章报道地木耳中含有起促进作用的物质，而这个物质被证实是地木耳（Nostoc commune）多糖。

2.2肿瘤侵袭机制

在我们的环境、饮食中存在许多诱变致癌因素。1.机体防御组织的功能降低，(l)人体外界防线，如头发，绒毛等均能排除和阻碍致病因素的侵入,当这些屏障发生破坏就容易发生肿瘤扩散,皮肤癌就是很好的例子。(2)正常菌群失调:体内菌中有的与致病菌拥有共同的抗原,有的能合成各类维生素，抗生素和细菌毒,所以有利于宿主抗病作用。(3)解毒，排毒能力降低:免疫系统的识别、清除以及修复能力降低,导致肿瘤病情的发展。3.内外致病因素联合战胜防御能力。2.致病因子，

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(1)环境(外界)致病因素的影响：生物致病因素，病毒方面如，乙肝病毒等；细菌方面如，幽门螺旋杆菌等。物理致病因素，放射线照射方面如，钴-60的持续照射；化学致病因子:多环芳烃类的化合物如苯丙胺、再如，亚硝胺、黄曲霉素、乙烯雌酚等长期接触可以引起肿瘤。必需营养元素缺乏也可以使人患癌；微量元素如果不足，如缺硒元素或者维生素类的长期缺乏也可诱发人体发生癌变。(2)机体(宿主)内部致病因子:遗传基因的缺陷，容易发生P53基因突变，可能使得造血器官，乳腺，胧，肝，脑，膀，肺和结肠发生常见癌变。精神刺激，在英国的一个报告会上面有报告称，二百多例恶性肿瘤患者中患癌前直接受过严重精神刺激的就有65%左右。 2.2.1 肿瘤

肿瘤是一种极不正常的肿块或组织,生长速度快,与正常组织不协调,受到刺激还会继续生长。肿瘤分为良性和恶性,良性肿瘤不是致命的。恶性肿瘤即癌,癌的发生和发展分致癌的启动(initiationofeareinogesis),促癌(promotion)和癌的形成和发展(development)三个阶段。它首先局部浸润周围组织,还能通过血液和淋巴系统转移到其他组织\侵袭!转移行为是恶性肿瘤的本质特征。癌侵袭(invasion)是指癌细胞脱离原发生长部位,突破基底膜和细胞外基质构成的屏障,侵袭毗邻的组织。首先癌细胞通过膜表面的受体与基底膜、基质成分如层粘连蛋白(laminin)、纤维粘连蛋白(fibroneetin)和胶原蛋白(eollagen)等结合,然后癌细胞分泌或诱导间质细胞分泌多种蛋白酶降解基底膜和基质,最后定向运动穿越破损的基底膜的基质部位\转移(metastasis)即癌细胞借助血管、可分为:a.原发瘤增殖,肿瘤新血管生成;b.肿瘤细胞侵袭毗邻的基底膜!基质和正常细胞;c.癌细胞穿入血管或淋巴管并在循环系统中存活;d.癌细胞栓塞、滞留于远隔靶器官的微血管中并增殖;e.癌细胞穿出血管或淋巴细胞,在靶器官内形成微转移灶;f.肿瘤间质内新血管生成,转移瘤快速生长。 2.2.2 瘤细胞从原发瘤体脱落

肿瘤形成以后，通过所在器官的弥散获得最初的生长营养，细胞逐渐分化、增生。当瘤体直径达到2mm以上，增殖生长要靠足够的血液供应。研究证明肿瘤细胞及间质细胞释放促血管生成的因子如血管内皮细胞生长因子（vascular endothelial cell growth factor ,VEGF）,血管形成素（angiogenin），成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF),白细胞介素-8（interleukin-8），

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血小板来源的内皮细胞生长因子（platelet-derived endothelial cell growth factor, PD-ECGF）等。这些因子使内皮细胞迁移、增殖形成管腔结构，最终在瘤体内部形成微血管网。

已有结果证明瘤细胞之间相互黏着的能力较正常细胞为低，透射电镜显示多种肿瘤细胞的桥粒、半桥粒和间隙连接数量减少。细胞内的钙含量也减少，这些都是构成粘附力降低的原因之一。另外还有报告瘤细胞表面电荷密度增加，相互排斥力加大，尤其是转移率高的细胞电泳率增高，这使得瘤细胞从瘤体脱落的可能性增加。 还有细胞表面的某些粘附分子缺失令细胞间连接遭受破坏，也有脱落的危险。

2.2.3 瘤细胞侵袭周围组织

肿瘤扩散发生最初是侵袭，而侵袭发生之后就会导致一个结果，就是扩散。瘤细胞在侵袭的过程中间，是先从母体细胞中脱落分离，然后在向临近组织侵袭，不过有研究表明这两种运动也可同时进行。在十九世纪鲁道夫·路德维希·卡尔·菲尔绍就提出了突变之后的癌细胞具有类似于阿米巴虫伸出借以向各方向运动的伪足，故移动迁移速度比非恶性肿瘤细胞快。目前已有多位学者提出，在肿瘤细胞可以利用伪足运动来完成侵袭周围组织的这一过程。这个过程当中，肿瘤细胞的表面将分泌多种物质因子，使得癌细胞改变相应的骨架，从而完成固定向其他组织器官侵袭扩散的运动。【5】

2.3天然抗肿瘤活性物质研究现状

2.3.1 广泛的天然抗肿瘤活性研究

目前,化疗药物广泛应用在大部分的抗肿瘤前线,具有很大的副作用和细胞毒性,而且耐药性就是由于这些化疗药物在与恶性肿瘤细胞长期接触后而产生的;上述问题几乎不会发生在天然抗癌提取物当中,天然产物不仅对身体的负面影响远远小于以往抗肿瘤药物,副作用伤害小的抗肿瘤新药的发展也有非常广阔的前途。所以,开发绿色的抗肿瘤活性物质也逐渐被提上了日程。[5]

如今已天然抗肿瘤活性物质被筛选得到也比较多,许许多多的抗肿瘤的作用原理也都差不多。比如说，紫杉醇（自中华紫杉分离的）能够对微管蛋白作用,最终使得细胞破裂凋亡。从Green tea中提取出的有效成分聚酷型儿茶素,能诱导HL-60细胞向稳定成熟细胞分化；人参皂苷Rg3是存在于中药人参中的四环三帖皂苷,其分子式为C42H72013,它可通过对肿瘤细胞新生血管形成的阻断,诱导细胞调亡，

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从而达到抗癌疗效；再如，灵芝和灵芝的有效成分可增强免疫系统的巨噬细胞的吞噬功能,促进T淋巴细胞增殖,增强免疫T细胞的细胞毒副作用；斛皮素(quercetin)是一种黄酮类物质，广泛存在的生物体内,是自由基的捕获剂和抗氧剂,减轻氧自由基对细胞的损害可能是其抗癌和防癌的机制；金爱康片剂,是一种天然钙拮抗剂，它是由汉防己甲素制成，而汉防己甲素是汉防己的根部分离出来的有效成分。研究显示表明单独使用化疗药物治疗恶性淋巴癌等急慢恶性肿瘤的缓解作用比它与化疗药物合用效果差很多。[6] 2.3.2 藻类抗肿瘤活性物质的研究

藻类植物含有许多抗肿瘤的活性物质，其中所含多糖是其有效成分，藻类多糖可以直接的或间接的抑制癌细胞增殖和侵袭。1，可通过对淋巴细胞的刺激并使其增殖；对巨噬细胞活性的提高；或者增强吞噬指数的方式，提高机体免疫细胞抑制癌细胞的能力。2，可通过增强红细胞膜的流动性，抑制癌细胞通过血液途径侵袭或转移，并抑制癌细胞增殖。

通过对曲显俊等螺旋藻多糖体内和体外抗肿瘤研究分析发现，钝顶螺旋藻多糖对白血病细胞有46.0%抑瘤率，对乳腺癌细胞有68%的抑瘤率。当螺旋藻多糖浓度达到300mg/kg时通过灌胃给药的方式对小鼠进行灌胃。结果发现，此浓度的螺旋藻多糖对小鼠肉瘤有55.2%的抑瘤率。在体外抗肿瘤实验过程中，周岩冰等研究发现，螺旋藻多糖能够抑制体外培养的直肠癌细胞、结肠癌细胞及胃癌细胞,而且一定范围内的抑制率和浓度呈线性关系,螺旋藻多糖在20mg/l剂量下时,对结肠及直肠癌细胞抑制率为42.04%。[10]

对羊栖菜中提取的羊栖菜多糖研究发现，其可以对特定的肿瘤血管内皮细胞的增殖起到抑制作用，而这种特定肿瘤被证实是人体体外培养的肺癌细胞所诱导的。

海带根中的一种抗乳腺癌物质，对其研究表明其为一种氨基酸。长叶海带能够明显延长同种同系淋巴细胞白血病的小鼠的生命延长率。[11]

2.4 划痕实验

细胞划痕实验是指将细胞培养到相互融合后再用无菌枪头在孔板中央区域画一条直线,导致这条直线内的细胞被物理机械力去除掉,用无菌PBS液洗干净,在培养液中继续进行培养,并观察细胞向划痕区域侵袭迁移的情况。通过细胞向划痕移动并使划痕宽度缩减的程度确定细胞的迁移运动能力。细胞划痕实验的优点是,实

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