微生物学检验重点(4)

适用于医学检验专业的同学们,仅供参考哦。

不利用型细菌(N)——有氧或无氧的环境中都不能分解葡萄糖，两管均不变色

产碱型细菌(K)——开放管变蓝，封闭管不变色

3、甲基红试验（MR试验）

①原理：细菌发酵葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步分解成甲酸、乙酸、乳酸等混合酸，培养基pH

下降至4.4以下，加入甲基红指示剂变为红色，为MR试验阳性；若因其他因素使培养基pH在5.4

以上，则甲基红指示剂呈黄色，为MR试验阴性。

②方法：将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水中，35℃培育18~24h，滴加甲基红试剂，呈现红色为MR

试验阳性，黄色为阴性

4、V-P试验

①原理：有些细菌在发酵葡萄糖产生丙酮酸后，能使丙酮酸脱羧生成中性的乙酰甲基甲醇，其在碱

性环境中北空气中的氧氧化成二乙酰，二乙酰与培养基内蛋白胨中精氨酸所含胍基发生反应，生成

红色化合物。

②方法：将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水中，35℃培育18~24h，按每毫升培养基加入0.3%肌酸或

肌酐的40%KOH溶液0.1ml，充分混匀后观察，出现红色为V-P试验阳性。

5、靛基质试验（吲哚试验）

①原理：某些细菌含色氨酸酶，分解培养基中的色氨酸产生靛基质（吲哚），靛基质与对二甲基氨

基苯甲醛反应，生成红色复合物。

②方法：将待测菌接种于葡萄糖蛋白胨水中，35℃培养18~24h，再在培养基中加入靛基质指示剂（对

二甲基氨基苯甲醛），试剂与培养基两液面接触处呈红色为阳性，无色为阴性。

6、硫化氢试验

①原理：有些细菌能分解培养基中的含硫氨基酸，产生H2S，H2S与培养基中Fe2+（或Pb2+）反

应生成黑色的硫化亚铁或硫化铅

②方法：接种细菌，35℃培养18~24h，呈现黑色沉淀者为阳性，无变化者为阴性

7、尿素酶试验

①原理：有些细菌能产生尿素酶，可分解尿素生成氨和CO2，氨在水液中形成碳酸铵，使培养基呈

碱性

②方法：将待检菌接种于尿素培养基中，培养后出现红色为阳性，不变色（橙色）为阴性。

8、苯丙氨酸脱氢酶试验

①原理：某些细菌能产生苯丙氨酸脱氢酶，可使苯丙氨酸脱氢形成苯丙酮酸，苯丙酮酸与10%氯化

铁作用形成绿色化合物。

②方法：将待测菌接种于苯丙氨酸琼脂斜面上（接种量稍大），培养后在斜面上直接滴加4~5滴10%

氯化铁试剂，出现绿色反应者即为阳性

9、氨基酸脱羧酶试验

①原理：某些细菌产生氨基酸脱羧酶，可分解氨基酸使其脱去羧基产生胺和CO2，胺使培养基呈碱

性反应

②方法：将待检菌分别接种于氨基酸脱羧酶培养基（含葡萄糖、精氨酸或鸟氨酸或赖氨酸，指示剂

为溴甲酚紫）和氨基对照管（不加氨基酸），培养后观察结果。

③结果鉴定：对照管为黄色，若培养基由黄色变为紫色为氨基酸脱羧酶试验阳性，若仅发酵葡萄糖

显黄色者为阴性。

10、枸橼酸盐利用实验

①原理：有些细菌能利用培养基中的枸橼酸盐作为唯一的碳源、铵盐作为唯一的碳源。细菌在生长

过程中分解枸橼酸盐产生碳酸盐，分解铵盐生成氨，使培养基变碱性。

②方法：将待测菌接种于枸橼酸盐培养基上，培养后观察。阳性——淡绿色变为深蓝色。

（二）其他试验

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