微生物学检验重点(10)

适用于医学检验专业的同学们,仅供参考哦。

（七）确定肠道杆菌的依据，共同生物学特点、埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、变形杆菌属的分离

培养方法与鉴定依据（标本、菌落、初步生化结果、如何区分、血清学鉴定程序）

1、确定依据即共同生物学特点：①革兰阴性菌；②MAC培养基：选择肠道的正常菌；③生化反应：氧化酶试验阴性，触酶阳性，还原硝酸盐为亚硝酸盐，O/F发酵型

2、变形杆菌

KIA：K A + + MIU：+ -/+ + G- MAC：无色透明或半透明 SS：无色透明或半透明，菌落中心可呈黑色 IMViC：-/+ + - - 迁徙性生长

（八）霍乱弧菌、副溶血弧菌的培养与鉴定方法及鉴定依据

（九）非发酵菌的概念、共同特点

1、非发酵革兰阴性杆菌：使是指一大群不能发酵葡萄糖或仅以氧化方式利用葡萄糖、需氧或兼性厌氧、不形成芽胞的革兰阴性杆菌。该类细菌多为条件致病菌。

2、共同特点：①氧化发酵试验常显示是氧化型或产碱型；②氧化酶阳性，非发酵菌中，除不动杆菌和嗜麦芽寡养单胞菌外氧化酶试验均为阳性，但并非所有氧化酶阳性的革兰阴性杆菌都是非发酵菌，如气单胞菌、弧菌属等也是氧化酶阳性但不是非发酵菌；③动力，非发酵菌大部分为专性需氧菌，在半固体上观察动力不明显，可用悬滴法或鞭毛染色法检测其动力。

（十）铜绿假单胞菌、产碱杆菌、不动杆菌的鉴定依据

1、铜绿假单胞菌

G- OXi（+） 氧化葡萄糖，木糖产酸不产气 还原硝酸盐产氮气 能利用枸橼酸盐

精氨酸双水解酶（+） 42℃生长，4℃不生长

2、产碱杆菌

G- 氧化酶阳性 触酶阳性 不分解糖类 部分菌株还原硝酸盐 利用枸橼酸盐

3、不动杆菌

G- 不发酵糖类 氧化酶阴性 硝酸盐还原阴性 动力阴性（三个阴性）

（十一）流感嗜血杆菌 “卫星现象”、结核分支杆菌的抗酸染色、培养特点、

1、流感嗜血杆菌的“卫星现象”：当流感嗜血杆菌与金黄色葡萄球菌一起培养时，可见到靠近葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌较大，而远离葡萄球菌菌落的流感嗜血杆菌较小，这种现象称为“卫星现象”

2、结核分枝杆菌：抗酸染色步骤：①初染：将已固定的涂片置于染色架上或用染色夹子夹住，滴加石

炭酸复红染液，并于载玻片下方以弱火加热至出现蒸气(勿煮沸或煮于)随时补充染液以防干涸，持续

5min，水洗；②脱色：用3％盐酸酒精脱色，直至涂片无红色染液脱下为止(不可超过10min)，水洗；

③复染：用吕氏美蓝复染0.5min，集菌涂片复染1～3min，水洗或印干(印干用的滤纸只能使用1次)

用油镜检查并记录结果

结果：油镜观察涂片，在淡蓝色背景下可见染成红色细长或略带弯曲的杆菌，并有分枝生长趋向，

此为抗酸染色阳性菌。其他细菌和细胞成蓝色。直接涂片标本中常见菌体单独存在，偶见团聚成堆者。

若在痰、脑脊液或胸、腹水中找到抗酸菌，其诊断意义较大。镜下所见结果按下列标准报告：

-：仔细观察至少300视野未发现抗酸菌；±：300个视野内发现1～2条抗酸菌(全部涂膜镜检3遍)；

+：100个视野内发现1～9条抗酸菌(全部涂膜镜检1遍)；2+：10个视野内发现1～9条抗酸菌；3+：

每个视野内发现1～9条抗酸菌；4+：每个视野内发现9条以上的抗酸菌。

3、培养特点：专性需氧，营养要求高，生长缓慢，常用罗氏固体培养基，在固体培养基上培养2~4周

后，形成菜花样R型菌落，液体培养基上呈表面生长，形成菌膜

（十二）厌氧菌的培养方法，产气荚膜梭菌的培养特点、破伤风梭菌、肉毒梭菌的致病特点

1、厌氧菌的培养方法：①厌氧缸法②厌氧袋法③厌氧手套箱法④厌氧盒⑤生物耗氧法⑥焦性未食子酸

法⑦庖肉培养基

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