实验一 鸡新城疫血凝(HA)和血凝抑制(HI)抗体水平测定法
④ 置振荡器上振荡1-2分钟,放18~22℃静置20分钟。
⑤ 每孔再加入0.7%红细胞悬浮液0.05毫升,放振荡器上振荡l-2分钟,置18-22℃,30-60分后判定结果。
⑥ 第十一孔为红细胞对照孔,第十二孔作为抗原对照孔。
结果观察:将反应板倾斜成45℃角,沉于管底的红细胞沿着倾斜面向下呈线状流动者为沉淀,表明红细胞未被或不完全被病毒凝集;如果孔底的红细胞铺平孔底,凝成均匀薄层,倾斜后红细胞不流动,说明红细胞被病毒所凝集。
能将4单位病毒物质凝集红细胞的作用完全抑制的血清最高稀释倍数,称为该血清的红细胞凝集抑制效价,用被检血清的稀释倍数或以2为底的对数(log2)表示。如上例,该血清的红细胞凝集抑制效价为1:64或HI效价为6(log2)。第十一孔仅含稀释液和红细胞为不凝集对照孔,第十二孔含稀释液,病毒液和红细胞为凝集对照孔。 结果分析如下:
① 一般认为鸡的免疫临界水平为1:8(成年)或1:16(雏鸡),但随地区不同而有差异。 ② 鸡血清的HI抗体效价高于1:16时可适当推迟新城疫免疫的时间,HI抗体效价在1:16以下,须马上进行新城疫疫苗接种,在新城疫流行的地区或鸡场,鸡的免疫临界水平,应再提高。
③ 鸡群的HI抗体水平是以抽检样品的HI抗体效价(1og2)的平均值表示的。
如果某鸡群的10份样品中,HI抗体效价为8的有3份样品,为7的有5份样品,为6的有2份样品,它们的平均值为:
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