毕业论文(设计)开题报告模版(2)

4 国内外现状和发展趋势与研究的主攻方向 4.1 国内外现状和发展趋势 黄酮类化合物是在植物中分布非常广泛的一类天然产物，其对植物的生长、发育、开花、结果及防菌防病等方面起着重要的作用。同时，黄酮类化合物生理活性多种多样，对人体有非常重要的保健作用，因此引起了人们的广泛研究。近十年来黄酮类化合物的研究倾向于其药用价值的开发，更多地涉及提取工艺的应用研究，从传统的提取方法如热水提取、有机溶剂提取、碱性水或碱性稀醇提取、系统溶剂提取法等，发展到新型的提取技术如超声波提取法、微波提取法、酶解法、超临界流体萃取法、半仿生提取法等。对黄酮类化合物的结构、功能等也有了深刻的了解，黄酮类化合物泛指两个苯环通过中央三碳链相互联结而成的一系列C6-C3-C6化合物，主要是指以2-苯基色原酮为母核的一类化合物，是具有酚羟基的一类还原性化合物。在复杂反应体系中，由于其自身被氧化而具有清除自由基和抗氧化作用。黄酮及其某些衍生物具有广泛的药理学特性，包括抗炎、抗诱变、抗心肌缺血、抗肿瘤形成与生长等活性。 现在已应用各种高新技术从各种植物中分离、提取了大量的黄酮类化合物。有关文献报道了从竹叶、银杏叶、菊花、苦荞等中提取黄酮类化合物，以及这些提取物抗氧化作用的研究情况。但从湖北海棠叶中提取黄酮类化合物还未见报道。近几年来，科学家对黄酮进行了广泛而深入的研究，发现了黄酮不少令人感兴趣的新用途，黄酮类天然产物是近年来天然药物和人类保健产品研究开发的热点。从植物中提取具有生理活性的黄酮作为抗氧化剂、天然药物、保健品和化妆品等行业的原料，已日益引起重视，其应用前景无限广阔。 4.2 研究的主攻方向 本实验采用新型技术超声波辅助乙醇提取湖北海棠叶中的黄酮类化合物，确定提取的最佳工艺参数，并研究提取液的还原能力和自由基清除能力。

5 主要研究内容、需重点研究的关键问题及解决思路 5.1 主要研究内容 采用超声波法提取湖北海棠叶中的黄酮类化合物，并对影响其提取的因素——提取温度，超声波处理时间，超声波功率，料液比进行单因素实验和正交实验，确定最佳的提取工艺，并参考Oyaizu方法，Fenton反应及邻苯三酚自氧化，分别测定湖北海棠叶中黄酮类化合物的还原能力和清除自由基的能力。 5.1.1 乙醇提取湖北海棠叶中的黄酮 将粉碎好的海棠叶在乙醇浓度50%，料液比1:20，水浴温度90℃条件下提取2 h，计算黄酮提取率。 5.1.2 超声波提取湖北海棠叶中黄酮化合物的工艺 湖北海棠叶→洗净→干燥→粉碎→乙醇浸泡→超声波提取→过滤→旋转蒸发→解吸→大孔树脂吸附→解吸→定容→测吸光度 黄酮提取率（%）=总黄酮质量?100 样品质量5.1.3 超声波提取温度对黄酮提取率的影响 称取相同质量的湖北海棠叶5份，分别在40℃，50℃，60℃，70℃，80℃，料液比1:20，超声波功率300 W条件下提取30min. 5.1.4 超声波处理时间对黄酮提取率的影响 称取相同质量的湖北海棠叶5份，在合适温度（5.1.3中得出），料液比1:20，超声波功率300 W的条件下分别提取10 min，15 min，30 min，45 min，60 min. 5.1.5 超声波功率对黄酮提取率的影响 称取相同质量的湖北海棠叶5份，分别用超声波功率100 W，200 W，300 W，400 W，500 W，在合适温度（5.1.3中得出），合适提取时间（5.1.4中得出），料液比1:20条件下提取。 5.1.6 料液比对黄酮提取率的影响 称取相同质量的湖北海棠叶5份，分别加入10 mL，20 mL，30 mL，40 mL，50 mL浓度为60%的乙醇溶液浸泡，在合适温度（5.1.3中得出），合适超声波功率（5.1.5中得出）下提取合适的时间（5.1.4中得出）。 5.1.7 超声波提取的最佳工艺确定 以超声波提取温度、超声波处理时间、超声波功率、料液比4个因素进行L9(34)正交实验（水平由单因素实验得出），确定最佳提取工艺参数。 5.1.8 提取物还原能力的测定 参考Oyaizu方法，取不同浓度的提取液，加入0.2 mol/L、pH 6.6磷酸钠缓冲溶液2.5 mL，1%铁氰化钾2.5 mL，50℃水浴20 min后急速冷却，加入10% 三氯乙酸溶液2.5 mL，于3000 r/min 离心10 min，取上清液5 mL，加蒸馏水4 mL，及0.1% FeCl3 1 mL，混匀后10 min于700 nm处测定吸光值，吸光值越大则还原能力越强。用蒸馏水作为无还原能力的样品对照，VC和VE作为有还原能力的样品对照。 5.1.9 提取物对自由基清除效果的测定 1. 提取物对羟基自由基清除效果的测定 参考Fenton反应，利用H2O2与Fe2+混合产生OH?，采用固定反应时间法，在相同体积的反应体系中分别加入两种方法提取的、不同浓度的提取液，并以蒸馏水为参比，在510 nm处测定空白对照液的吸光度A0，以及各浓度下的吸光度Ax。 清除率=(A0?AX)?100% A02. 提取物对超氧阴离子自由基清除效果的测定 采用邻苯三酚自氧化法。25℃恒温水浴条件下，移取50 mmol/L邻苯三酚0.2 mL于20 mL带塞试管，加入pH 8.2的Tris-HCl缓冲溶液11.4 mL，加入不同浓度提取液0.4 mL，迅速混匀，4 min后，以蒸馏水作空白对照，在320 nm处测吸光值。 清除率=(A0?AX)?100% A05.2研究中的关键问题及解决思路 研究中需解决的关键问题是确定超声波提取湖北海棠叶中黄酮类化合物的最佳工艺和测定提取液的还原能力及清除自由基的能力。通过单因素实验和正交实验确定最佳提取工艺。其还原能力用Oyaizu方法测定。选用羟基自由基和超氧阴离子自由基，将不同浓度的提取液加入Fenton反应体系中反应一定的时间，然后测定其吸光度来探讨黄酮类化合物对羟基自由基的清除能力；采用邻苯三酚自氧化法测定清除超氧阴离子自由基的能力。

6 完成毕业设计(论文)所必须具备的工作条件（如工具书、计算机辅助设计、某类市场调研、实验设备和实验环境条件等）及解决的办法 6.1 资料来源 中国知网（CNKI）、CALIS外文期刊网、Springer外文期刊。 6.2 实验中主要设备、仪器及药品 6.2.1 主要设备及仪器 PL303型电子分析天平、S101-3电热鼓风干燥箱、微型高速万能试样粉碎机、恒温水浴锅、722S分光光度计超声波发生器、回流及蒸馏装置、旋转蒸发器。 6.2.2 主要实验药品 无水乙醇，亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠，芦丁，铁氰化钾，三氯乙酸，磷酸钠，抗坏血酸，维生素E，水杨酸钠，双氧水，三羟甲基氨基甲苯（Tris），邻苯三酚（以上药品均为分析纯）。 大孔树脂。 7 工作的主要阶段、进度与时间安排 XXXX年10月至XXXX年11月 查询和收集资料，完成开题报告； XXXX年11月至XXXX年2月 完成研究内容，处理实验数据； XXXX年5月至XXXX年6月 撰写毕业论文，参加论文答辩。

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