DNA重组技术 分子生物学 - 图文(5)

第二节基因工程的酶学基础1.限制性核酸内切酶（Restriction endonuclease）限制性核酸内切酶是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核苷酸序列（4—8bp），并由此处切割DNA双链的核酸内切酶。来源于原核生物，属于核酸内切酶，即在核酸分子链的内部制造切口的酶。1.1限制与修饰现象细菌的限制和修饰系统（R/M体系），是细菌的一种自我保护作用。（1）限制（Restriction）

限制性内切酶将侵入细菌体内的外源DNA切成小片断（2）修饰（Modification）

细菌自身的DNA碱基被甲基化酶甲基化修饰所保护，不能被自身的限制性内切酶识别切割。①Dam甲基化酶：GATC 腺嘌呤N6位置引入甲基②Dcm甲基化酶：CCAGG或CCTGG序列在第二个C上C5位置上引入甲基第二节基因工程的酶学基础I 型限制性内切酶1.2限制性内切酶的类型1.2.1 I型限制性内切酶II 类限制性内切酶III类限制性内切酶首先由M. Meselson和R. Yuan在1968年从大肠杆菌B株和K株分离的，如EcoB和EcoK。（1）识别位点序列：未甲基化修饰的特异序列。EcoB：TGA(N)8TGCT EcoK：AAC(N)6GTGC第二节切开一条单链。基因工程的酶学基础（2）切割位点：在距离特异性识别位点约1000—1500 bp处随机Recognize site1-1.5kbcut（3）作用机理：需ATP、Mg2+和SAM（S-腺苷蛋氨酸）。

百度搜索“77cn”或“免费范文网”即可找到本站免费阅读全部范文。收藏本站方便下次阅读，免费范文网，提供经典小说综合文库DNA重组技术 分子生物学 - 图文(5)在线全文阅读。