论文大孔树脂柱色谱法分离纯化茶皂素的方法研究(3)

大孔树脂柱色谱法分离纯化茶皂素的方法研究

茶皂素含量测定采用重量法和分光光度法进行[14]。

1.2.2.树脂的预处理[5]

树脂在80%乙醇中浸泡24 h,充分溶胀后用蒸馏水冲洗至无白色浑浊物出现,用5%盐酸浸泡2 h,蒸馏水冲洗至中性,再用2%NaOH溶液浸泡2h,蒸馏水洗至中性备用。

1.2.3 静态吸附试验[5]

用50%的乙醇加热溶解提取的粗茶皂素，选择合适的树脂，分别改变乙醇相溶液的pH值，茶皂素质量浓度，吸附时间，考察其对吸附效果的影响。

1.2.4 动态脱附试验[14,15]:

（1）取600×40mm分离柱一支，称取预处理过的HPD－100树脂100g, 量取溶有15g左右粗茶皂素(茶皂素含量为60.78％)的乙醇/水溶液100mL，用5% (质量分数) HCl调节其pH=3.5，加入树脂中混匀后装柱，柱底部用少许玻璃棉堵塞，以防树脂随脱附液流出。加少量水使得柱中充满溶液，静态吸附1.5h后，打开底部活塞，使多于液体流出，并从顶部在此加入流出的液体再次吸附，反复多次。

（2）取1000mL蒸馏水，用分液漏斗缓慢滴入分离柱中，在10mL/min流速下，进行洗脱，收集洗脱液，经蒸馏除去溶剂过滤得到固体物，烘干称重，并测定其中茶皂素含量。

（3）分别更换乙醇浓度（体积比）为20％、50％、80％和90％的乙醇/水混合洗脱液，在与（2）同样用量和流速条件下进行洗脱试验，经蒸馏除去溶剂过滤得到固体物，烘干称重，并测定其中茶皂素含量。

（4）更换另两种树脂HPD-100A、AB-8，用同种方法试验，用0％、20％、80％三种不同浓度洗脱液洗脱，收集80％洗脱液，蒸馏至干，恒重称量并测定茶皂素含量，计算纯化回收率。

以上所有试验均在室温下进行。

3、结果与讨论

3.1 静态吸附过程考察

图2 粗茶皂素提取制备工艺流程图

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