sgdfg
能稳定出现的差异带用于数据分析。１?４ 聚类分析
采用Ｎｅｉ＆Ｌｉ遗传相似系数（ｇｅｎｅｔｉｃｓｉｍｉｌａｒｉｔｙ，ＧＳ）计算各样品之间的遗传相似度，其计算公式为ＧＳ２Ｎ［（ＮＮ）＋（ＮＮ）］，式中ＮＡＢ＝１１／１１＋０１１１＋１０１１表示Ａ和Ｂ共有的条带，Ｎ表示Ａ有而Ｂ没有的１０Ｎ表示Ａ没有而Ｂ有的条带。遗传距离（ｇｅ?条带，０１ｎｅｔｉｃｄｉｓｔａｎｃｅ，ＧＤ）ＧＤ＝１?ＧＳ。利用ＮＴＳＹＳ?ｐｃ（ｖｅｒ?ｓｉｏｎ２?１０ｅ）分析软件对数据进行分析，采用非加权配对算术平均法（ｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄｐａｉｒｇｒｏｕｐｍｅｔｈｏｄａｒｉｔｈ?ｍｅｔｉｃａｖｅｒａｇｅｓ，ＵＰＧＭＡ）进行聚类分析，构建聚类图。２ 结果与分析２?１ ＩＳＳＲ多态性水平
从４１条引物中筛选出１０条能够扩增出清晰、稳定条带的ＩＳＳＲ引物，扩增条带的相对分子量从２００～１２００ｂｐ不等。共扩增得到１０６条可区分的Ｄ
ＮＡ条带，每个引物检测到的位点在８～１５个，平均每条引物可扩增出１０个条带。在这１０６条带中，有多态性条带９３条，占所观察到的总扩增带的８７?７％，每个引物可扩增出６～１５条多态性带，平均每条引物产生９条多态性条带，各引物检测到的多态性条带的比例从６０?０％到１００％（表１）。
表１ ＩＳＳＲ引物序列和多态性分析
引物
碱基序列扩增带数多态性带多态性率片段大小（
５′?３′）／条／条／％／ｂｐＵＢＣ８０７（ＡＧ）８Ｔ９９１００
２００～１２００
ＵＢＣ８０９（ＡＧ）８Ｇ１３１１８４．６２００～１１００ＵＢＣ８１７（ＣＡ）８Ａ１２９７５．０１００～７００ＵＢＣ８２３（ＴＣ）８Ｃ１０９９０．０２００～１１００ＵＢＣ８２５（ＡＣ）８Ｔ１３１２９２．３２００～１１００ＵＢＣ８２６（ＡＣ）８Ｃ１０８８０．０２００～１１００ＵＢＣ８２９（ＴＧ）８Ｃ８８１００
２００～１０００ＵＢＣ８３４（ＡＧ）８ＹＴ８６７５．０３００～１１００ＵＢＣ８４２（ＧＡ）８ＹＧ８６７５．０３００～８００ＵＢＣ８４８（ＣＡ）８
ＲＧ１５
１５
１００
３００～１２００
２?２ ＩＳＳＲ指纹图谱构建
实验用１０条ＩＳＳＲ引物对２０个样品进行ＰＣＲ扩增，建立相应的ＤＮＡ指纹图谱（图１）。其中ＵＢＣ８２３引物对山药习惯用品的ＤＮＡ基因组扩增
产物的多态性最大。·３０１８·
图１ ＩＳＳＲ引物ＵＢＣ８０９，８２３，８４８对２０个样品
的扩增特征图谱
２?３ ＩＳＳＲ聚类分析
计算２０个样品间的遗传相似系数（表２），得到参薯各样品的遗传相似系数在０?６７２９～０?９９０７，其中２号与３号样品间的相似系数最低，为０?６７２９，５与６号，５号与９号以及６号与７号样品之间的相似系数最高，均为０?９９０７；参薯与褐苞薯蓣、山薯的遗传相似系数分别在０?４５７９～０?５３２７和０?５７０１～０?７３８３。结果表明，参薯与褐苞薯蓣、山薯之间均存在较明显的差异现象，且参薯种内也具有丰富的遗传多样性。ＵＰＧＭＡ聚类分析，得到树状图（图２，坐标显示为Ｎｅｉ氏相似系数），从图２可以看出，参薯１６个样品可划分为４组：第１组含有２号、１２号样品；第２组为１号样品；第３组含有３号、１１号、４号、１３号样品；其余９个样品归为第４组。参薯先与山薯进行聚类，然后再与褐苞薯蓣聚类。３ 讨论
本实验采用ＩＳＳＲ分子标记技术分析了山药遗传多样性水平，表明３种薯蓣属植物种间存在差异；褐苞薯蓣、山薯种内遗传差异小，相似系数均在０?９８以上；参薯作为产区主要的栽培品种，种内遗传差异显著，１６个样品相似系数在０?６７２９～０?９９０７。
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