实验一 光学显微镜的使用及植物细胞的观察
【实验目的】 掌握显微镜使用方法;掌握植物细胞基本结构;学习表皮制片法及绘制植物细胞图的基本技术。
【实验材料】 洋葱鳞茎、显微镜、载玻片、盖玻片、碘-碘化钾试液。 【实验内容】
(一)显微镜的构造与使用
(二)植物细胞基本结构的观察
1.表皮细胞的结构
(1)细胞壁:为植物细胞所特有,包围在原生质体最外面。由于细胞壁无色透明,故观察时上面和下面的壁不易看见,而只能看到侧壁。
(2)细胞质:为无色透明胶体,成熟细胞由于中央大液泡形成,细胞质被大液泡挤成一薄层,紧贴细胞壁,仅细胞两端较明显。
(3)细胞核:为一个近圆形小球体,它由更稠的原生质组成。
(4)液泡:在成熟细胞的原生质体中,可见到一个或几个大液泡位于细胞中央,里面充满了细胞液,看起来比细胞质透明。
作业
绘制洋葱鳞叶的内表皮细胞2~3个,并注明细胞的各部分名称。
实验二 植物细胞的质体、后含物的观察
【目的要求】 掌握质体、淀粉粒、草酸钙结晶类型,掌握徒手切片、粉末装片及水合氯醛透化制片的方法。
【材料用品】 胡萝卜根、红辣椒果实、马铃薯块茎、半夏粉末、大黄粉末、甘草粉末。显微镜、酒精灯。碘.碘化钾溶液、水合氯醛试剂、稀甘油、蒸馏水。 【内容方法】 1.质体的观察
(1)有色体(杂色体):取胡萝卜根一小块,用徒手切片法制成临时装片,置镜下观察,在细胞的细胞质内可见许多橙黄色或橙红色呈棒状、块状或针状的结构,此即为有色体。也可以用镊子挑取红辣椒靠近果皮的果肉少许,置于载玻片上捣碎后,作临时装片观察,可见细胞内有许多棱形或圆形橙红色的小颗粒,即为有色体。
2.淀粉粒的观察
(1)用镊子或刀片在马铃薯块茎切口上刮取少量白色浆液:用蒸馏水装片观察,在低倍镜下可见水溶液与多边形薄壁细胞中有许多卵圆形或椭圆形颗粒,即淀粉粒。转换高倍镜,并将光线适当调暗,可见淀粉粒有脐点和围绕它清晰的偏心轮纹。
观察后,从载物台上取下制片,在盖玻片一侧滴入一小滴碘-碘化钾溶液,同时在另一侧用吸水纸吸取蒸馏水,再置显微镜下观察,淀粉呈蓝-紫色反应。 (2)取少量半夏粉末置于滴加1~2滴稀甘油的载玻片上,用解剖针充分搅匀后,加盖盖玻片制成粉末装片,置镜下观察。 3.草酸钙结晶的观察
(1)取大黄根茎粉末少许,置于滴加1—2滴水合氯醛的载玻片上。在酒精灯上文火慢慢加热进行透化,注意不要煮沸和蒸干,直至材料颜色变浅而透明时停止处理,加稀甘油1滴并盖上盖玻片。置镜下观察,可见到许多大型、形如星状的草酸钙簇晶。
(2)取甘草粉末少许,按上述方法制片,置镜下观察。在粉末中可见到一些方形、不规则形及斜方形等形状的草酸钙方晶。这些方晶常成行排列于纤维束旁边的薄壁细胞中。
(3)取半夏粉末少许,按上述方法透化后制片观察,可见散在或成束的草酸钙针晶。
【作业】
绘制马铃薯淀粉粒、半夏粉末、大黄根茎粉末草酸钙簇晶形态图,并注明各部分名称。
实验三 植物组织的细胞形态和显微特征
【目的要求】 掌握毛茸、气孔、纤维、石细胞的显微特征,辨认导管、油细胞、油室、乳汁管的显微特征,学会徒手切片制作和组织粉末透化法。
【材料用品】 薄荷叶、天竺葵叶、忍冬叶、菊花叶、黄芩粉末、梨果实、黄豆芽、鲜姜、橘皮、蒲公英茎。
显微镜、解剖用具、培养皿、水合氯醛试液、稀甘油、盐酸、间苯三酚试液。 【内容方法】 1.毛茸
(1)非腺毛:(示教)用镊子撕取下表皮一小片,制成临时水装片,镜检。 单细胞毛:取忍冬叶的临时制片,置显微镜下观察,可见由一个细胞组成的顶端尖锐的单细胞毛茸,其上具疣状突起。
多细胞毛:取天竺葵叶的临时制片,置显微镜下观察,可见在表皮细胞上有数个细胞组成的非腺毛。
丁字形毛:取菊花叶的临时制片,置显微镜下观察,可见毛茸顶部有一个横生的大细胞,柄部由2—3个细胞组成,并与顶生细胞相垂直呈丁字形。
(2)腺毛:观察薄荷叶下表皮临时水装片,可见其表皮上的毛茸有三种: 腺毛:腺毛较少,由单细胞的头和单细胞的柄组成。头细胞中常充满黄色挥发油。
腺鳞:腺鳞较多,腺头大而明显,扁圆球形,常由6—8个细胞组成,排列在同一平面上,周围有角质层,与其腺头细胞之间贮有挥发油,腺柄极短为单细胞。
非腺毛:非腺毛较大,顶端尖锐,多由3—8个细胞单列构成,以4个为其多见,也有单细胞的,细胞壁较厚。 2.气孔
(1)直轴式(横列型)气孔:取薄荷叶下表皮制成临时水装片,镜检,可见气孔周围的两个副卫细胞的长轴与保卫细胞和气孔的长轴相垂直。
(2)不定式(无规则型)气孔:取天竺葵叶的下表皮制成临时水装片,镜检,
可见副卫细胞的数目不定,其形状与一般表皮细胞相似。 3.纤维、石细胞、导管
(1)观察黄芩韧皮纤维、石细胞和导管:取黄芩粉末少许,用水合氯醛试液透化后,制成临时标本片,置显微镜下观察,可见韧皮纤维众多,梭形,单个或多个成束,完整或折断;细胞壁加厚明显并木质化,纹孔道明显。石细胞较多,多呈类圆形、类方形或不规则形,细胞壁木质化,加厚显著,纹孔道明显,网纹导管较多,具缘纹孔导管较少。
(2)观察梨果实的石细胞:用刀片刮取梨果肉少许,如(1)制成临时标本片,可见石细胞成团或散在,大小不一,形状有椭圆形、类圆形、长方形及不规则形,细胞壁很厚,有层纹或不明显,纹孔道分枝或不分枝。相连的石细胞纹孔对显著。 (3)观察黄豆芽的导管(示教):观察根、茎、叶等新鲜材料的内部结构,通常采用徒手切片法制成临时标本片。徒手切片法操作简便迅速,能保持细胞及其含有物的原有形态,且利于各种显微化学反应。
切取黄豆芽下胚轴一段,长约0.5cm,用镊子或其他夹持物固定在载玻片上,用刀片纵切取中央的薄片置载玻片上,加水合氯醛试液透化,置显微镜下观察,可见环纹导管、螺纹导管、梯纹导管及网纹导管。取下标本片,用滤纸吸去水合氯醛试液,滴加间苯三酚和盐酸各一滴,放置片刻镜检,可见各种导管,木质化壁呈红色。
4.油细胞、油室、乳汁管
(1)油细胞:取鲜姜作徒手切片,制成临时水装片,置显微镜下观察,可见薄壁组织中,有许多类圆形的油细胞,胞腔内含淡黄色挥发油滴散在或成群。 (2)油室:取橘皮横切片置显微镜下观察,可见一些大而呈椭圆形的腔隙,在腔隙周围可看到有部分破裂的分泌细胞,该腔隙就是油室。 。
(3)乳汁管(示教):观察蒲公英茎的徒手纵切片,可见分枝状的乳汁管。 【作业思考】
1.绘制薄荷叶的非腺毛、腺毛和气孔图。
2.绘制黄芩的韧皮纤维、石细胞、网纹导管图。 3.绘制姜的油细胞及橘皮油室图。
实验四 根的特征和构造
【目的要求】 掌握根的外形特征、根系的类型,熟悉双子叶植物根的初生构造及次生构造,了解根的异常构造,变态类型。
【材料用品】 桔梗或蒲公英、小麦或葱、何首乌、麦冬、菟丝子、吊兰或石斛、常春藤等植物的标本或药材;毛茛根的初生构造横切片、蚕豆根的次生构造横切片、何首乌块根横切片。 显微镜,解剖用具。 【内容方法】
(一)观察根的外形特征
1.直根系 观察桔梗或蒲公英的外形特征及根系。分辨出主根、侧根和纤维根。
2.须根系 观察小麦或葱的外形特征及根系,注意有无主根和侧根的区别。 (二)变态根的类型
1.块根 观察何首乌、麦冬等植物的根,何首乌的主根、侧根的一部分膨大成块根,麦冬的不定根形成纺锤形的块根。
2.寄生根观察菟丝子伸入寄主植物体茎内形成的根。 3.气生根 观察吊兰或石斛在空气中形成的不定根。
4.攀援根观察常春藤的茎上产生的能攀附其他物体的不定根。 (三)观察双子叶植物毛茛根的初生构造
取毛茛的根的初生构造横切片,置显微镜下由外到内观察,可见下列结构: 1.表皮 位于根的最外方,由一层排列紧密整齐的细胞组成。细胞壁不角质化,没有气孔,一部分细胞外壁突出形成根毛。
2.皮层 位于表皮的内方,占根相当大的部分,由多层排列疏松的薄壁细胞组成。明显分为三部分。
外皮层:为紧靠表皮下方的一列较小的排列紧密的薄壁细胞。
皮层薄壁组织:占皮层的绝大部分,细胞近圆形,排列比较疏松,含有较多的淀粉粒。
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