2007-2011年高考生物试题分类汇编14生物技术实践(4)

(mL) 缓冲液(mL) 果胶酶液(mL) 蜗牛酶液(mL) 纤维素酶液(mL) 实验结果 (绿色深浅程度)

(注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化)

— — — + + + + + + + + + 0 O 0 O 0 0.5 O 0 O O 0.5 0 O 0 O 0.5 O 0 0 2 1 0.5 0.5 0.5

(1)实验过程中，需要轻摇试管，其目的是▲ ，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。

(2)从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有 ▲ 等多种酶。该实验中▲ 是空白对照组，其设置意义是▲ 。

(3)用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用 ▲ 洗涤。 (4)原生质体是否符合要求还需进行检验，其检验的方法是 ▲ 。 【答案】(6分)(1)为了使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果 (2)果胶酶和纤维素酶I、Ⅱ、Ⅲ排除无关变量的干扰 (3)等渗溶液 (4)低渗涨破法

23．（2009江苏多选）下列关于DNA和蛋白质提取与分离实验的叙述，正确的有 A．提取细胞中的DNA和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞 B．用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析出DNA可去除蛋白质 C．蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的DNA D．蛋白质和DNA都可以用电泳的方法进行分离纯化

【答案】BD

38. （2009广东A卷）（10分）生物技术实践

（1）商品化植酸酶主要来自微生物。在产酶菌株筛选过程中，常在基本培养基中添加不溶于水的植酸钙制成固体平板，植酸钙被植酸酶分解后可在平板上产生 ，可根据其大小选择目的菌株，所得菌株需要进一步测定植酸酶活性。活性测定可以植酸钠作为底物，活性可用一定条件下单位时间 表示。 （2）利用上述所得菌株制备植酸酶的流程如下图

Ⅰ中的主要成分为 ；Ⅱ中包含多种酸酶等多种蛋白质。请写出一种纯化得到植酸酶的方法及其依据。

（3）为建设基因工程菌，可用PCR等技术从上述菌株中克隆植酸酶基因。PCR反应包含多次循环，每次循环包括三步： 。反应过程中打开模板DNA双链的方法是 。 【答案】（1）透明圈 植酸钠的消耗量（肌醇和磷酸的生成量） （2）小分子杂质

凝胶色谱法：根据蛋白质之间分子大小，吸附性质等差异进行纯化。（或电泳法：根据蛋白质之间电荷，分子大小等差异进行纯化。） （3）变性，复性，和延伸 加热 （4）蛋白酶，脂肪酶，纤维素酶

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