(5)相关参数
(6)引物序列
TACCTGAAGTCCTCGTCGTTGCCGC TCACCAGGGCCCGGTCAGCGTTCTT 3.进行PCR扩增
Tm为74.1℃。具体的温度需设置74℃上下的温度梯度进行筛选,利用凝胶电泳进行PCR产物的鉴定。
4.选择合适的质粒,将PCR产物与质粒进行酶切 5.将连接好的质粒,导入大肠杆菌中进行克隆并且表达 6.产物的鉴定 (1)Western blotting
将上述克隆的大肠杆菌提取总蛋白,利用bZIP转录因子抗体进行western blotting检测,从而判断该序列是否为bZIP转录因子的基因序列ABI5. (2)免疫组化
利用bZIP转录因子抗体和带荧光的二抗对上述改造的大肠杆菌进行免疫染色,从而判断bZIP转录因子是否表达
(4)质谱:利用质谱技术检测bZIP转录因子是否表达。
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