3、延伸,DNA聚合酶使引物3ˊ端向前延伸,合成与模板互补的DNA新链
用途:1基因的扩增、制备DNA探针、定为诱变、DNA测序
2临床医学 传染病的检测、遗传病的诊断、对癌基因的分析 3在法医上 鉴别个体、判定亲缘关系
38、什么叫基因工程?试图示并简述其基本过程(265)
定义: 把分离到的或合成的基因经过改造,插入到载体中,然后导入宿主细胞内,使其扩增和表达,从而获得大量基因产物或产生生物新的性状
过程:1基因的分离与合成2 外源基因与载体DNA的体外重组3 重组DNA导入受体细胞
4 目的克隆的筛选与鉴定5 控制外源基因的表达
附加题一、发酵工业中微生物受到噬菌体污染后会出现哪些现象?防治噬菌体的污染有哪些措施?
附加题二、什么是效价?什么叫噬菌斑?简述测定噬菌体效价的双层平板法?(P71,周德庆)
效价:每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数,又称噬菌斑形成单位数或感染中心数。
噬菌斑:在涂布有敏感宿主细胞的固体培养基表面,若接种上相应噬菌体的稀释液,其中每一噬菌体粒子由于先侵染和裂解一个细胞,然后以此为中心,再反复侵染和裂解周围大量的细胞,就在菌苔上形成一个具有一定形状、大小、边缘和透明度的噬菌斑,可用于纯种分离和计数。
双层平板法:底层平板—(~2%琼脂培养基7~8mL) ]
[上层培养基(~1%琼脂培养基3mL)] ]37℃,10余h,计数噬菌斑
上层平板—[宿主菌悬液(对数期菌液0.2mL) ] 混匀 ]
[噬菌体试样(合适稀释液0.1mL) ]
预先分别配制含2%和1%琼脂的底层培养基和上层培养基。先用底层?在培养皿上浇一层平板,凝固后,把预先融化冰冷却到45°C以下,加有较浓的敏感宿主和一定体积待测噬菌体样品的上层培养基,摇匀,立即倒在底层?上铺平待凝,37℃下保温。经10余h后即可对噬菌斑计数、
思考题一、请设计一实验来决定在一种特定的细菌中发生的遗传转移过程是转化、转导还是接合?说明每一种的预期结果246
设想有下列条件和材料可以利用:⑴合适的突变株和选择培养基;⑵DNas(一种降解裸露DNA分子的酶);⑶2种滤板:一种能够持留细菌和细菌病毒,但不能持留游离的DNA分子;另一种滤板只能持留细菌;⑷一种可以插入滤板使其分隔成2个空间的玻璃容器
思考题二、根据突变的光复活修复作用、原理,你认为在进行紫外线诱变处理时,应注意什么?为了使被诱变的细胞能均匀地受到紫外线照射,你讲如何做?
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