7.答:维持蛋白质空间构象稳定的作用力是次级键,此外,二硫键也起一定的作用。当某些因素破坏了这些作用力时,蛋白质的空间构象即遭到破坏,引起变性。 8.答:蛋白质的重要作用主要有以下几方面:
(1)生物催化作用 酶是蛋白质,具有催化能力,新陈代谢的所有化学反应几乎都是在酶的催化下进行的。
(2)结构蛋白 有些蛋白质的功能是参与细胞和组织的建成。 (3)运输功能 如血红蛋白具有运输氧的功能。
(4)收缩运动 收缩蛋白(如肌动蛋白和肌球蛋白)与肌肉收缩和细胞运动密切相关。 (5)激素功能 动物体内的激素许多是蛋白质或多肽,是调节新陈代谢的生理活性物质。 (6)免疫保护功能 抗体是蛋白质,能与特异抗原结合以清除抗原的作用,具有免疫功能。 (7)贮藏蛋白 有些蛋白质具有贮藏功能,如植物种子的谷蛋白可供种子萌发时利用。 (8)接受和传递信息 生物体中的受体蛋白能专一地接受和传递外界的信息。 (9)控制生长与分化 有些蛋白参与细胞生长与分化的调控。
(10)毒蛋白 能引起机体中毒症状和死亡的异体蛋白,如细菌毒素、蛇毒、蝎毒、蓖麻毒素等。 9.答:(a)异硫氢酸苯酯;(b)丹黄酰氯;(c)脲、β-巯基乙醇;(d)胰凝乳蛋白酶;(e)
CNBr; (f)胰蛋白酶。 10.答:(1)可能在7位和19位打弯,因为脯氨酸常出现在打弯处。 (2)13位和24位的半胱氨酸可形成二硫键。
(3)分布在外表面的为极性和带电荷的残基:Asp、Gln和Lys;分布在内部的是非极性的氨基酸残基:Try、Leu和Val;Thr尽管有极性,但疏水性也很强,因此,它出现在外表面和内部的可能性都有。
酶与辅酶
(一)名词解释
1.米氏常数(Km值)
2.底物专一性(substrate specificity) 3.辅基(prosthetic group)
4.单体酶(monomeric enzyme) 5.寡聚酶(oligomeric enzyme) 6.多酶体系(multienzyme system) 7.激活剂(activator)
8.抑制剂(inhibitor inhibiton) 9.变构酶(allosteric enzyme) 10.同工酶(isozyme)
11.诱导酶(induced enzyme) 12.酶原(zymogen)
13.酶的比活力(enzymatic compare energy) 14.活性中心(active center)
(二)英文缩写符号
1.NAD+(nicotinamide adenine dinucleotide) 2.FAD(flavin adenine dinucleotide) 3.THFA(tetrahydrofolic acid)
4.NADP+(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate) 5.FMN(flavin mononucleotide) 6.CoA(coenzyme A)
7.ACP(acyl carrier protein)
8.BCCP(biotin carboxyl carrier protein) 9.PLP(pyridoxal phosphate)
(三)填空题
1.酶是 产生的,具有催化活性的 。 2.酶具有 、 、 和 等催化特点。
3.影响酶促反应速度的因素有 、 、 、 、
和 。
4.胰凝乳蛋白酶的活性中心主要含有 、 、和 基,三者构成一个氢键体系,使其中的 上的 成为强烈的亲核基团,此系统称为 系统或 。
5.与酶催化的高效率有关的因素有 、 、 、 、 等。
6.丙二酸和戊二酸都是琥珀酸脱氢酶的 抑制剂。 7.变构酶的特点是:(1) ,(2) ,它不符合一般
的 ,当以V对[S]作图时,它表现出 型曲线,而非 曲线。它是 酶。
8.转氨酶的辅因子为 即维生素 。其有三种形式,分别
为 、 、 ,其中 在氨基酸代谢中非常重要,是 、 和 的辅酶。
9.叶酸以其 起辅酶的作用,它有 和 两种还原形式,后者的功能作为
载体。
10.一条多肽链Asn-His-Lys-Asp-Phe-Glu-Ile-Arg-Glu-Tyr-Gly-Arg经胰蛋白酶水解可得到
个多肽。
11.全酶由 和 组成,在催化反应时,二者所起的作用不同,其中 决定酶
的专一性和高效率, 起传递电子、原子或化学基团的作用。 12.辅助因子包括 、 和 等。其中 与酶蛋白结合紧密,需要 除去, 与酶蛋白结合疏松,可以用 除去。
13.T.R.Cech和S.Alman因各自发现了 而共同获得1989年的诺贝尔奖(化学
奖)。
14.根据国际系统分类法,所有的酶按所催化的化学反应的性质可分为六
类 、 、 、 、 、 和 。 15.根据国际酶学委员会的规定,每一种酶都有一个唯一的编号。醇脱氢酶的编号是
EC1.1.1.1,EC代表 ,4个数字分别代表 、 、 和 。
16.根据酶的专一性程度不同,酶的专一性可以分为 、 、
和 。 17.酶的活性中心包括 和 两个功能部位,其中 直接与
底物结合,决定酶的专一性, 是发生化学变化的部位,决定催化反应的性质。
18.酶活力是指 ,一般用 表示。
19.通常讨论酶促反应的反应速度时,指的是反应的 速度,即 时测得的
反应速度。
20.解释别构酶作用机理的假说有 模型和 模型两种。
21.固定化酶的优点包括 , ,
等。
22.pH值影响酶活力的原因可能有以下几方面:影响 ,影
响 ,影响 。 23.温度对酶活力影响有以下两方面:一方面 ,另一方面 。
24.脲酶只作用于尿素,而不作用于其他任何底物,因此它具有 专一性;甘
油激酶可以催化甘油磷酸化,仅生成甘油-1-磷酸一种底物,因此它具有 专一性。
25.酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk作图法),得到的直线在横轴的截距
为 ,纵轴上的截距为 。
26.磺胺类药物可以抑制 酶,从而抑制细菌生长繁殖。 27.判断一个纯化酶的方法优劣的主要依据是酶的 和 。 28.维生素是维持生物体正常生长所必需的一类_________有机物质。主要作用是作为
_________的组分参与体内代谢。
29.根据维生素的____________性质,可将维生素分为两类,即____________和
____________。
30.维生素B1由__________环与___________环通过__________相连,主要功能是以
__________形式,作为____________和____________的辅酶,转移二碳单位。
31.维生素B2的化学结构可以分为二部分,即____________和____________,其中
____________原子上可以加氢,因此有氧化型和还原型之分。
32.维生素B3由__________与_________通过___________相连而成,可以与__________,
_________和___________共同组成辅酶___________,作为各种____________反应的辅酶,传递____________。
33.维生素B5是_________衍生物,有_________,_________两种形式,其辅酶形式是
________与_________,作为_______酶的辅酶,起递______作用。
34.生物素可看作由____________,____________,____________三部分组成,是
____________的辅酶,在____________的固定中起重要的作用。
35.维生素B12是唯一含____________的维生素,由____________,____________和氨基丙
酸三部分组成,有多种辅酶形式。其中____________是变位酶的辅酶,____________是转甲基酶的辅酶。
36.维生素C是____________的辅酶,另外还具有____________作用等。
(四)选择题
1.酶的活性中心是指:
A.酶分子上含有必需基团的肽段 B.酶分子与底物结合的部位
C.酶分子与辅酶结合的部位 D.酶分子发挥催化作用的关键性结构区 E.酶分子有丝氨酸残基、二硫键存在的区域 2.酶催化作用对能量的影响在于:
A.增加产物能量水平 B.降低活化能 C.降低反应物能量水平 D.降低反应的自由能 E.增加活化能 3.竞争性抑制剂作用特点是:
A.与酶的底物竞争激活剂 B.与酶的底物竞争酶的活性中心
C.与酶的底物竞争酶的辅基 D.与酶的底物竞争酶的必需基团; E.与酶的底物竞争酶的变构剂
4.竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列那种因素无关:
A.作用时间 B.抑制剂浓度 C.底物浓度 D.酶与抑制剂的亲和力的大小 E.酶与底物的亲和力的大小 5.哪一种情况可用增加[S]的方法减轻抑制程度:
A.不可逆抑制作用 B.竞争性可逆抑制作用 C.非竞争性可逆抑制作用 D.反竞争性可逆抑制作用 E.无法确定 6.酶的竞争性可逆抑制剂可以使:
A.Vmax减小,Km减小 B.Vmax增加,Km增加 C.Vmax不变,Km增加 D.Vmax不变,Km减小 E.Vmax减小,Km增加
7.下列常见抑制剂中,除哪个外都是不可逆抑制剂:
A 有机磷化合物 B 有机汞化合物 C 有机砷化合物 D 氰化物 E 磺胺类药物
8.酶的活化和去活化循环中,酶的磷酸化和去磷酸化位点通常在酶的哪一种氨基酸残基上: A.天冬氨酸 B.脯氨酸 C.赖氨酸 D.丝氨酸 E.甘氨酸
9.在生理条件下,下列哪种基团既可以作为H+的受体,也可以作为H+的供体:
A.His的咪唑基 B.Lys的ε氨基 C.Arg的胍基 D.Cys的巯基 E.Trp的吲哚基
10.对于下列哪种抑制作用,抑制程度为50%时,[I]=Ki :
A.不可逆抑制作用 B.竞争性可逆抑制作用
C.非竞争性可逆抑制作用 D.反竞争性可逆抑制作用 E.无法确定 11.下列辅酶中的哪个不是来自于维生素:
A.CoA B.CoQ C.PLP D.FH2 E.FMN 12.下列叙述中哪一种是正确的:
A.所有的辅酶都包含维生素组分
B.所有的维生素都可以作为辅酶或辅酶的组分
C.所有的B族维生素都可以作为辅酶或辅酶的组分 D.只有B族维生素可以作为辅酶或辅酶的组分 13.多食糖类需补充:
A.维生素B1 B.维生素B2 C.维生素B5 D.维生素B6 E.维生素B7 14.多食肉类,需补充:
A.维生素B1 B.维生素B2 C.维生素B5 D.维生素B6 E.维生素B7
15.以玉米为主食,容易导致下列哪种维生素的缺乏:
A.维生素B1 B.维生素B2 C.维生素B5 D.维生素B6 E.维生素B7
16.下列化合物中除哪个外,常作为能量合剂使用:
A.CoA B.ATP C.胰岛素 D.生物素 17.下列化合物中哪个不含环状结构:
A.叶酸 B.泛酸 C.烟酸 D.生物素 E.核黄素 18.下列化合物中哪个不含腺苷酸组分:
A.CoA B.FMN C.FAD D.NAD+ E.NADP+ 19.需要维生素B6作为辅酶的氨基酸反应有:
A.成盐、成酯和转氨 B.成酰氯反应 C.烷基化反应 D.成酯、转氨和脱羧 E.转氨、脱羧和消旋
(五)是非判断题
( )1.酶促反应的初速度与底物浓度无关。
( )2.当底物处于饱和水平时,酶促反应的速度与酶浓度成正比。 ( )3.某些酶的Km由于代谢产物存在而发生改变,而这些代谢产物在结构上与底物无关。 ( )4.某些调节酶的V-[S]的S形曲线表明,酶与少量底物的结合增加了酶对后续底物分
子的亲和力。
( )5.测定酶活力时,底物浓度不必大于酶浓度。
( )6.测定酶活力时,一般测定产物生成量比测定底物消耗量更为准确。
( )7.在非竞争性抑制剂存在下,加入足量的底物,酶促的反应能够达到正常Vmax。 ( )8.碘乙酸因可与活性中心-SH以共价键结合而抑制巯基酶,而使糖酵解途径受阻。 ( )9.诱导酶是指当细胞加入特定诱导物后,诱导产生的酶,这种诱导物往往是该酶的产
物。
( )10.酶可以促成化学反应向正反应方向转移。
( )11.对于可逆反应而言,酶既可以改变正反应速度,也可以改变逆反应速度。 ( )12.酶只能改变化学反应的活化能而不能改变化学反应的平衡常数。 ( )13.酶活力的测定实际上就是酶的定量测定。
( )14.从鼠脑分离的己糖激酶可以作用于葡萄糖(Km=6×10-6mol/L)或果糖(Km=2×
10-3mol/L),则己糖激酶对果糖的亲和力更高。
( )15.Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶浓度无关 ( )16.Km是酶的特征常数,在任何条件下,Km是常数。
( )17.Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶的底物无关。 ( )18.一种酶有几种底物就有几种Km值。
( )19.当[S]>>Km时, V趋向于Vmax,此时只有通过增加[E]来增加V。 ( )20.酶的最适pH值是一个常数,每一种酶只有一个确定的最适pH值。
( )21.酶的最适温度与酶的作用时间有关,作用时间长,则最适温度高,作用时间短,
则最适温度低。
( )22.金属离子作为酶的激活剂,有的可以相互取代,有的可以相互拮抗。 ( )23.增加不可逆抑制剂的浓度,可以实现酶活性的完全抑制。 ( )24.竞争性可逆抑制剂一定与酶的底物结合在酶的同一部位。
( )25.由1g粗酶制剂经纯化后得到10mg电泳纯的酶制剂,那么酶的比活较原来提高了
100倍。
( )26.酶反应的最适pH值只取决于酶蛋白本身的结构。 ( )27.所有B族维生素都是杂环化合物。
( )28.B族维生素都可以作为辅酶的组分参与代谢。 ( )29.脂溶性维生素都不能作为辅酶参与代谢。
( )30.除了动物外,其他生物包括植物、微生物的生长也有需要维生素的现象。 ( )31.植物的某些器官可以自行合成某些维生素,并供给植物整体生长所需。 ( )32.维生素E不容易被氧化,因此可做抗氧化剂。
(六)问答题及计算题
1.怎样证明酶是蛋白质?
2.简述酶作为生物催化剂与一般化学催化剂的共性及其个性? 3.简述Cech及Altman是如何发现具有催化活性的RNA的? 4.试指出下列每种酶具有哪种类型的专一性?
(1)脲酶(只催化尿素NH2CONH2的水解,但不能作用于NH2CONHCH3);
(2)β-D-葡萄糖苷酶(只作用于β-D-葡萄糖形成的各种糖甘,但不能作用于其他的糖苷,例如果糖苷);
(3)酯酶(作用于R1COOR2的水解反应);
(4)L-氨基酸氧化酶(只作用于L-氨基酸,而不能作用于D-氨基酸); (5)反丁烯二酸水合酶[只作用于反丁烯二酸(延胡索酸),而不能作用于顺丁烯二酸(马来酸)];
(6)甘油激酶(催化甘油磷酸化,生成甘油-1-磷酸)。
5.称取25mg蛋白酶配成25mL溶液,取2mL溶液测得含蛋白氮0.2mg,另取0.1mL溶液
测酶活力,结果每小时可以水解酪蛋白产生1500μg酪氨酸,假定1个酶活力单位定义为每分钟产生1μg酪氨酸的酶量,请计算: (1)酶溶液的蛋白浓度及比活。
(2)每克纯酶制剂的总蛋白含量及总活力。 6.Vmax与米氏常数可以通过作图法求得,试比较V~[S]图,双倒数图,V~V/[S]作图,[S]/V~[S]作图及直接线性作图法求Vmax和Km的优缺点? 7.(1)为什么某些肠道寄生虫如蛔虫在体内不会被消化道内的胃蛋白酶、胰蛋白酶消化? (2)为什么蚕豆必须煮熟后食用,否则容易引起不适?
8.使用下表数据,作图判断抑制剂类型(竞争性还是非竞争性可逆抑制剂)?
[S] mmol/L 2.0 3.0 4.0 10.0 15.0
每小时形成产物的量 (μmol) 13.9 17.9 21.3 31.3 37.0
(没有抑制剂)
每小时形成产物的量(μmol) 8.8 12.1 14.9 25.7 31.3
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