生化工程复习题(2013.下)(5)

身并不带电荷，但在保存和使用的过程中可能因为氧化等原因产生羧基等而带上负电荷，，此时带正电荷的物质因静电力导致Kd 值升高。

附资料：首先将样品加入，接着以水或其他溶液进行洗脱，即得洗脱曲线。最先流出的是物质A，A 的分子量最大，完全不能进入颗粒内部，只能从颗粒间隙流过，称“全排阻”。其流经体积最小，等于外水体积V 0 。最后流出的是物质C，它的分子量最小，其分子可以自由进出凝胶颗粒，这叫做“全渗入”。流经体积是外水体积与内水体积之和V 0 +V i 。物质B 的分子量介于渗入限与排阻限之间，其分子能够部分地进入凝胶颗粒之中。这叫作“部分排阻”或“部分渗入”。它的流径体积V e 是全部外水体积加上内水体积的一部分，即V e =V0 +K d V i 。K d 称作“排阻系数” 或“分配系数”。分配系数K d 排阻系数： 当K d =1 时，洗脱体积V e =V 0 +V i ，为全渗入。当K d =0 时，洗脱体积V e =V 0 ，为全排阻。0＜K d ＜1 时，洗脱体积V e =V o +K d V i ，为部分渗入。在特殊情况下，某些物质的Kd 值可以大于1，这是因为该种物质分子与凝胶之间有吸附作用。小分子物质的K d 值却小于1，这是因为有水合作用的存在。其中包括该物质分子的水合作用，或者是凝胶本身的水合作用。

20.离子交换层析装柱时，树脂在柱内有明显的分界线，这是由于什么原因造成的？ 答：装柱

转型再生好的交换剂先放人烧杯，加入少量水，边搅拌边倒人垂直固定的层析柱中，使交换剂缓慢沉降。交换剂在柱内必须分布均匀，不应有明显的分界线，严防气泡产生，否则将严重影响交换性能。为防止气泡和分界线(即所谓“节”)的出现，在装柱时，可在柱内先加入一定高度的水，一般为柱长的1／3，再加人交换剂就可借水的浮力而缓慢沉降。同时控制排液口放速率，以保持交换剂面上水的高度不变，交换剂就会连续地缓慢沉降，“节”和气泡就不会产生。

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