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分子生物学考试复习题 名词解释 简答题(3)

来源:网络收集 时间:2018-12-06 下载这篇文档 手机版
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2、反式作用因子: 是指能直接或间接地识别或结合在各类顺式作用元件核心序列上参与调控靶基因转录效率的蛋白质,当发生突变时,将影响不同染色体上等位基因的表达。 3、结构基因: 是决定合成某一种蛋白质分子结构相应的一段DNA。结构基因的功能是把携带的遗传信息转录给mRNA(信使核糖核酸),再以mRNA为模板合成具有特定氨基酸序列的蛋白质。 4、调节基因: 是调节蛋白质合成的基因。它能使结构基因在需要某种酶时就合成某种酶,不需要时,则停止合成,它对不同染色体上的结构基因有调节作用。 5、操纵基因: 位于结构基因的一端,是操纵结构基因的基因。当操作基因“开动”时,处于同一染色体上的,由它所控制的结构基因就开始转录、翻译和合成蛋白质。当“关闭”时,结构基因就停止转录与、翻译。操作基因与一系列受它操纵的结构基因合起来就形成一个操纵子。 6、阻遏蛋白: 阻遏蛋白是基于某种调节基因所制成的一种控制蛋白质,在原核生物中具有抑制特定基因(群)产生特征蛋白质的作用。 7、操纵子: 指包含结构基因、操纵基因以及启动基因的一些相邻基因组成的DNA片段,其中结构基因的表达受到操纵基因的调控。

8、辅阻遏物: 在可阻遏系统中,产生阻遏作用的小分子物质则叫做辅阻遏物

9、组成型表达: 指在一个生物生命的全过程中以及一个个体的所有细胞类型中均持续表达,很少受环境因素影响的基因,通常还把他们称为“管家基因”。

10、诱导型表达: 指某些基因的表达极易受环境变化的影响,在特定环境信号的刺激下,有的基因表达开放或增强;有的基因表达关闭或下降。

11、IPTG、效应物: 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷,是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质,常用于蓝白斑筛选。 12、CAP: 环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein ) 13、cAMP-CAP: 操纵子都是由cAMP-CAP调节的。cAMP-CAP复合物是一个不同于阻遏物的正调控因子

14、多顺反子: 一个mRNA分子编码多个多肽链。这些多肽链对应的DNA片断则位于同一转录单位内,享用同一对起点和终点。

15、单顺反子: 真核基因转录产物为单顺反子,即一种基因编码一种多肽链或RNA链,每个基因转录有各自的调节元件。 16、Attenuator弱化子: 当trp操纵子的mRNA合成起始以后,除非培养基中完全没有色氨酸,转录总是仅产生—个140个核苷酸的RNA分子即终止。这个区域称为衰减子或弱化子。

17、上游启动子元件: TATA框上游的保守序列称为上游启动子元件或上游激活序列

二、填空题

1.启动子中的元件通常可以分为两种:核心启动子元件

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和上游启动子元件

2. 因表达正调控系统中,加入调节蛋白后,基因表达活性被开启,这种调节蛋白被称为无辅基诱导蛋白。在负调控系统中,加入调节蛋白后,基因表达活性被关闭,这种调节蛋白被称为阻遏蛋白。

3. 糖对细菌有双重作用;一方面可以作为碳源供细胞生长;另一方面它又是细胞壁的成分。所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。有G时转录从S2开始,无G时转录从S1开始。

? 、简答题

1、乳糖操纵子的作用机制?

⑴乳糖操纵子的组成:大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I。

⑵阻遏蛋白的负性调节:没有乳糖存在时,I基因编码的阻遏蛋白结合于操纵序列O处,乳糖操纵子处于阻遏状态,不能合成分解乳糖的三种酶;有乳糖存在时,乳糖作为诱导物诱导阻遏蛋白变构,不能结合于操纵序列,乳糖操纵子被诱导开放合成分解乳糖的三种酶。所以,乳糖操纵子的这种调控机制为可诱导的负调控。

⑶CAP的正性调节:在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CAP结合,使CAP发生变构,CAP结合于乳糖操纵子启动序列附近的CAP结合位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,调节蛋白结合于操纵子后促进结构基因的转录,对乳糖操纵子实行正调控,加速合成分解乳糖的三种酶。

⑷协调调节:乳糖操纵子中的I基因编码的阻遏蛋白的负调控与CAP的正调控两种机制,互相协调、互相制约。

2、正调控和负调控的主要不同是什么?

负调控时,调节基因的蛋白质产物是基因活性的一种阻遏物,而在正调控时,调节基因的产物是一种激活物。

3、区别(1)启动子增效突变与启动子减效突变;(2)上游序列和下游序列。

(1)启动子内部的突变会增强或降低转录水平。

(2)同启动子有关,下游序列同转录.的方向一致;上游序列同转录方向相反。

4、哪三个序列对原核生物mRNA的精确转录是必不可少的?

⑴启动子(Promotor),在启动子序列-10bp和-35bp处, 有两个由6个核苷酸组成的共有序列(consensus sequence),这些区段的碱基被命名为-10区和-35区。许多启动子的-10区核苷酸序列相似,为

TATAAT,称为TATA box,又叫Pribnow框,为RNA Pol牢固结合的位点,简称结合位点。在-35区,大部分启动子为TTGACA序列,为RNA Pol的σ亚基识别位点,又称Sextama框。

⑵编码序列,指导mRNA的合成。

⑶终止子,功能是使RNA的合成停止在终止点位置,RNA Pol停止RNA,释放mRNA。

5、葡萄糖是如何影响涉及糖代谢的操纵子(葡萄糖敏感型操纵子)的表达?

在缺乏葡萄糖时,cAMP的水平升高,CAP蛋白同每一个葡萄糖敏感操纵子中启动子内的 CAP 位 点结合,转录作用协同起始。如果有葡萄糖,cAMP的.水平下降,CAP蛋白不再结合,转录的速率协同下降。

6. 简述乳糖操纵子的正负调控机制 ⑴阻遏蛋白的负调控

①当细胞内有诱导物时,诱导物结合阻遏蛋白,此刻聚合酶与启动子形成开放式启动子复合物转录乳糖操纵子结构基因。

②当无诱导物时,阻遏蛋白结合与启动子与蛋白质部分重叠不转录。 ⑵CAP正调控

①当细胞内缺少葡萄糖时ATP→CAMP结合,CRP生成CAP与CAP位点结合,增前RNA聚合酶转录活性。

②当有葡萄糖存在时CAMP分解多合成少,CAP不与启动子上的CAP位点结合RNA聚合酶不与操纵区结合无法起始转录结构基因表达下降。

7. 激活蛋白(CAP)对转录的正调控作用? 环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMPactivated protein )。当大肠杆菌生长在缺乏葡萄糖的培养基中时,CAP合成量增加,CAP具有激活乳糖(Lac)等启动子的功能。一些依赖于CRP的启动子缺乏一般启动子所具有的典型的-35区序列特征(TTGACA)。因此RNA聚合酶难以与其结合。 CAP的存在(功能):能显著提高酶与启动子结合常数。主要表现以下二方面:

①CAP通过改变启动子的构象以及与酶的相互作用帮助酶分子正确定向,以便与-10区结合,起到取代-35区功能的作用。

②CAP还能抑制RNA聚合酶与DNA中其它位点的结合,从而提高与其特定启动子结合的概率。

8. 简述衰减子的作用机理。

大肠杆菌中,衰减作用依赖于转录和翻译的紧密偶联。RNA聚合酶刚转录出前导肽的部分密码子,核糖体就开始翻译。当细胞中有色氨酸时,核糖体能够顺利地翻译出整个前导肽而在终止密码子UGA(+70)处停下来。

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这时核糖体占据了序列1和部分序列2,使序列2和序列3不能配对,因而序列3和4配对产生终止子的发夹结构,实现转录的终止。当出现色氨酸饥饿时,核糖体停顿两个trp密码子上,这时,核糖体占据了序列1,而留下完整的序列2以便于和转录出或即将转录出的序列3形成二级结构,这样当序列4转录出来后仍是单链状态,即终止子不能形成,于是转录继续下去。

9、当lacZ-或lacY-突变体生长在含乳糖的培养基上时,lac操纵子中剩余的基因没有被诱导,解释是何原因。 异乳糖是乳糖操纵子的天然诱导物,它是乳糖经过末诱导细胞中的少量 β-半乳糖苷酶代谢产生的。在 lac突变中完全不存在 β-半乳糖苷酶,乳糖不能被代谢,在 lacZ-中完全没有透性酶,因此乳糖不能进入细胞。这样,两种突变体中都不能产生异乳糖,因此操纵子中的其余基因都不能被培养基中的乳糖诱导表达。但是其它的基因能被像 IPTG这样的安慰诱导物诱导,因为 IPTG既能作为诱导物,又不需透性酶的帮助就能进入细胞。

10、衰减作用如何调控E.coli中色氨酸操纵子的表达? 衰减作用根据 tRNATrp的数量去调节 Trp操纵子的表达,而 tRNATrp的数量又取决于细胞中 Trp的水平.Trp操纵子 mRNA前导序列很长,包括了编码一个长 14个氨基酸的多肽所需的全部遗传信息(包括一个 AUG起始密码和一个 UGA 终止密码)。这个多肽含有两个相邻的 Trp残基,因此色氨酰-tRNA对前导肽的翻译是必不可少的。衰减作用发生的必要条件是:(1)翻译产生前导多肽;(2)转录和翻译的偶联。这样,当 RNA聚合酶转录前导序列的同时核糖体就紧接着结合到新生的 mRNA上翻译产生前导肽。mRNA 的前导序列包括两对相似的反向重复序列。序列 2与序列 1和 3部分互补, 这样 1+2或 2+3或 3+4或 1+2和 3+4 都能通过碱基配对形成茎环结构。 由序列 3和 4 配对形成的茎环结构与 Trp操纵子的终止子基本相同。和终止子一样, 在其茎的 3’一侧具有 7 个连续的 U 形成的尾巴。当形成这种衰减子结构时,它就能像终止子一样使转录终止。注意到两个 Trp密码位于序列 1 内,而且前导肽的终止密码在序列 l 和 2之间。这样,如果色氨酸的量是充足的,那么,tRNATrp的含量也能够使前导肽的翻译进行到终止密码 UGA。 结合的核糖体覆盖了 l和 2两个区域,这样 1 和 2、2和 3 两个序列就不能形成茎环结构,这就使 3,4两个序列形成衰减子环并起到终止子的作用,导致 RNA聚合酶分子脱离 DNA模板。另一方面,如果色氨酸缺乏,那么存在的色氨酰-tRNA也很少,导致核糖体停止在两个 Trp密码之前,这样核糖体仅盖住区域 l,并在序列 4 被转录之前,序列 2 和序列 3 形成茎环结构。这个结构的形成阻止了序列 3 与序列 4形成终止子结构。于是,出现通读,切操纵子的其他部分被继续转录。事实上,是 mRNA 上核糖体所在的位置决定mRNA 的二级结构和衰减作用是否发生。

12、举例说明原核生物基因表达调控的机理。 在E.coli 乳糖操纵子中,其结构基因为lacZ,lacy,lacA,

这三个基因别离编码β-D半乳糖苷酶,β-D半乳糖苷透性酶,β-D半乳糖苷转乙酰酶。其调节基因为lacI,编码阻遏蛋白。启动子为lacP,操纵基因为lacO。负调控:当细胞内无引诱物时,阻遏蛋白能够与操纵基因联合。因为操纵基因与启动子有一定程度的重叠,是以妨碍了RNA聚合酶在-10序列上形成开放性的启动子复合物。当细胞内有引诱物存在时,引诱物以极高的浓度与阻遏蛋白快速联合,从而改变了阻遏蛋白的构象,使之快速地从操纵基因上解离下来。这样,RNA聚合酶就能与启动子牢固联合并形成开放性启动子复合物,从而开始转录lacZYA结构基因。正调控:cAMP-CAP复合物是乳糖操纵子的正调控因子。乳糖启动子有两个CAP联合位点,一个是在-70到-50(位点I),另一个是在-50-D-40(位点II)。位点I包含一个逆向反复序列,这彷佛是大多数强联合位点的特征。位点II是一个很弱的联合位点,但是当cAMP-CAP复合物联合于位点I时,位点II联合cAMP-CAP复合物的能力显著提高。一旦位点II被占领,RNA聚合酶就很快与-35序列联合,然后在于-10序列联合。

13、预测具有下列突变的λ噬菌体感染细菌的表型,并说明原因:(1)产生一个抗蛋白酶的λCII蛋白的突变。(2)具有阻止蛋白结合结合的λOR2的突变。(3)使λ基因失去作用的突变。(4)编码λCI蛋白的基因突变。 (1)产生蛋白酶抗性cⅡ蛋白的λ噬菌体突变体会导致溶源(1ysogeny)。λ噬菌体感,染过程中,在N蛋白(从PL的左侧表达)使基因表达不在N基因下游终止前,所有的生理功能都是正常的。抗终止导致c又及cro基因下游的表达,从而cⅡ蛋白合成。由于λcⅡ蛋白的突变体具有蛋白酶抗性,它的活性并不依辞于被感染细胞的状态(健康的或病态的),而且cⅡ蛋白并不维持cⅡ蛋白的整合。由此导致的高浓度cⅡ蛋白有助于从PRE和P1启动子的转录,因此cI蛋白(阻抑蛋白)、cro反义RNA、和整合酶(λ噬菌体整合所需)被合成。阻抑蛋白占据0R和OL操纵基因,通过自调节促进自身的合成(从PRM表达),从而防止更多的N蛋白和Cro蛋白的合成。

(2)能够阻止蛋白质结合的0R2突变体会导致裂解。0R2搬突变体能够防止Cro蛋白和阻抑蛋白与之结合。cro基因表达不需要诱导物,因此可以高水平表达。 Cro蛋白也能与OR3进行非协同结合,由于有这种结合以及阻抑基因表达需要自身产物的自诱导,因此不能形成阻抑蛋白。Cro最终会关闭所有早期基因的表达,并通过诱导从PQ开始的表达从而诱发中期和后期基因的表达。综上所述;Cro会摆脱阻抑蛋白的影响。

(3)失活λN基因的突变令导致灭活和降解。N基因的产物是一个抗终止子,是N 和cro基因外的其他基因表达所需的。其结果为大量缺陷的N蛋白和Cro蛋白的合成。因此噬菌体既不能进入溶源状态也不能进入裂解途径,DNA最终被降解。

(4)编码cI蛋白的基因发生突变时会导致快速裂解。产生没有功能的阻抑蛋白不能与0R和OL操纵基因结合,由于没有了竞争,Cro会摆脱阻抑蛋白的影响。

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第七章

? 名词解释

1、增强子: 指增加同它连锁的基因转录频率的DNA序列。增强

子是通过启动子来增加转录的。有效的增强子可以位于基因的5’端,也可位于基因的3’端,有的还可位于基因的内含子中。

2、基因扩增: 细胞内选择性复制DNA, 产生大量的拷贝。 3、基因重排: 通过基因的转座,DNA的断裂错接而使正常基因顺序发生改变

4、基序: DNA,蛋白质等生物大分子中的保守序列。 5、沉默子: 与基因表达负调控的一种元件,当其结合特异蛋白因子时,对基因转录起阻遏作用。

6、绝缘子: 长约几百个核苷酸对,是通常位于启动子同正调控元件(增强子)或负调控因子(为异染色质)之间的一种调控序列。绝缘子本身对基因的表达既没有正效应,也没有负效应,其作用只是不让其他调控元件对基因的活化效应或失活效应发生作用。

7、DNA结合结构域: 肽链或蛋白分子中能结合DNA的一个结构区域,通过与DNA结合发挥作用(eg.调控基因表达)。

8、同源异型盒: 简称同源框,是同源异型基因中一段高度保守的DNA序列。源框由180个碱基对组成的序列,可编码60个氨基酸。同源框普遍存在于果蝇、鼠、人、蛙等生物中。

9、断裂基因: 基因的编码顺序由若干非编码区域(间隔序列)隔开,使阅读框不连续,这种基因称为隔裂基因。 10、应答元件: 是位于基因上游能被转录因子识别和结合,从而调控基因专一性表达DNA序列。

11、螺旋-环-螺旋基序: 由2个α螺旋间隔一个非螺旋的环(loop)组成.如原癌基因产物C-myc及其结合蛋白Max.

12、螺旋-转角-螺旋基序: 两段螺旋被一短的转角结构分开,其中一段螺旋为DNA识别螺旋。

13、bZIP蛋白: 蛋白的亮氨酸拉链附近存在碱性结构域的蛋白

14、锌指结构: 由肽链的保守序列中的一对组氨酸加一对半胱氨酸(His2/Cys2)或2对半胱氨酸(cys2/cys2)与一个锌离子形成配位键,这些氨基酸对之间的多肤链成环状突出并折迭成指形结构,多个指结构常串联重复。锌指族转录因子以二聚体形式同DNA上的顺式调控元件结合。

15、上游启动子元件: TATA框上游的保守序列称为上游启动子元件或上游激活序列

16、Gene expression: 是指基因转录为RNA及翻译为蛋白质的过程。其表达产物包括mRNA、tRNA、rRNA、蛋白质与多肽。

17、RNAi: RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。

? 简答题

1、简述真核生物转录水平的调控机制?

真核生物在转录水平的调控主要是通过反式作用因子、顺式作用元件和RNA聚合酶的相互作用来完成的,主要是反式作用因子结合顺式作用元件后影响转录起始复合物的形成过程。A、转录起始复合物的形成:真核生物RNA聚合酶识别的是由通用转录因子与DNA形成的蛋白质-DNA复合物,只有当一个或多个转录因子结合到DNA上,形成有功能的启动子,才能被RNA聚合酶所识别并结合。转录起始复合物的形成过程为:TFⅡD结合TATA盒;RNA聚合酶识别并结合TFⅡD-DNA复合物形成一个闭合的复合物;其他转录因子与RNA聚合酶结合形成一个开放复合物。在这个过程中,反式作用因子的作用是:促进或抑制TFⅡD与TATA盒结合;促进或抑制RNA聚合酶与TFⅡD-DNA复合物的结合;促进或抑制转录起始复合物的形成。B、反式作用因子:一般具有三个功能域(DNA识别结合域、转录活性域和结合其他蛋白结合域);能识别并结合上游调控区中的顺式作用元件;对基因的表达有正性或负性调控作用。3、转录起始的调控:⑴反式作用因子的活性调节:A.表达式调节——反式作用因子合成出来就具有活性;B.共价修饰——磷酸化和去磷酸化,糖基化;C.配体结合——许多激素受体是反式作用因子;D.蛋白质与蛋白质相互作用——蛋白质与蛋白质复合物的解离与形成。⑵反式作用因子与顺式作用元件的结合:反式作用因子被激活后,即可识别并结合上游启动子元件和增强子中的保守性序列,对基因转录起调节作用。⑶反式作用因子的作用方式——成环、扭曲、滑动、Oozing。⑷反式作用因子的组合式调控作用:每一种反式作用因子结合顺式作用元件后虽然可以发挥促进或抑制作用,但反式作用因子对基因调控不是由单一因子完成的而是几种因子组合发挥特定的作用。

2、简述真核生物转录后水平的调控机制?

⑴5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化的调控意义:5,端加帽和3,端多聚腺苷酸化是保持mRNA稳定的一个重要因素,它至少保证mRNA在转录过程中不被降解。 ⑵mRNA选择性剪接对基因表达调控的作用 ⑶mRNA运输的控制

3、cAMP信号转导途径?

1、组成:胞外信息分子(主要是胰高血糖素、肾上腺素和促肾上腺皮质激素),受体,G蛋白,AC,cAMP , PKA。2、途径:

信号分子与受体结合,引起受体构象变化 受体活化G蛋白

活化后的G蛋白激活腺苷酸环化酶(AC) AC催化ATP生成cAMP

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cAMP活化PKA,PKA使目标蛋白磷酸化,调节代谢酶的活性或调节基因的表达

4、为什么mRNA的翻译起始密码子的上游必须含有不被翻译的核苷酸?

在原核生物mRNA的起始密码子(AUG)附近(5'方向上游)的一小段长短不等的顺序,含有较多的嘌呤核苷酸,被称为SD顺序。它能和核糖体小亚基上的16SrRNA的3'端富含嘧啶核苷酸的区域配对结合,有助于带有甲酰甲硫氨酸的起始tRNA识别mRNA上的起始密码(AUG),使肽链合成从此开始。与原核mRNA相似,真核mRNA5'端不翻译区(也叫前导顺序)中常有一段顺序与核糖体小亚基上的18SrRNA的3'端的一段顺序互补并结合,这种结合与真核mRNA的翻译启动有关。

5、原核生物与真核生物启动子的主要差别? 原核生物

TTGACA --- TATAAT------起始位点 -35 -10 真核生物

增强子---GC ---CAAT----TATAA—5mGpp—起始位点 -110 -70 -25

6、比较原核生物与真核生物基因组结构的异同,并指出真核生物细胞的RNA内含子剪接的主要方式。

答案要点:主要从重复序列情况,有无内含子外显子方面论述,剪接的主要方式指GU-AG和 AU-AC类内含子的间接以及错误!未找到引用源。、错误!未找到引用源。类内含子的间接方式。

7、比较原核生物与真核生物基因表达调控的异同点。 共同点是两者主要是在转录水平进行调控;不同点是原核生物转录与翻译偶联,以操纵子调控的现象普遍;真核生物基因表达复杂,转录和翻译是分开的,转录后从细胞核进入细胞质,调控因此也比较复杂,在DNA水平、转录水平和翻译水平均存在。

8、简述在真核基因表达调控中,结合在不同部位的调控蛋白质之间相互作用的可能方式。

不同基因由不同的上游启动子元件组成,能与不同的转录因子结合,这些转录因子通过与基础的转录复合体作用而影响转录的效率。现在已经发现有许多不同的转录因子,看到的现象是:同一DNA序列可被不同的蛋白因子所识别;能直接结合DNA序列的蛋白因子是少数,但不同的蛋白因子间可以相互作用,因而多数转录因子是通过蛋白质-蛋白质间作用与DNA序列联系并影响转录效率的。转录因子之间或转录因子与DNA的结合都会引起构象的变化,从而影响转录的效率。

作为蛋白质的转录因子从功能上分析其结构可包含有不同区域:

1)DNA结合域(DNA binding domain),多由60-100个氨基酸残基组织的几个亚区组成;

2)转录激活域(activating domain),常由30-100氨基酸残基组成,这结构域有富含酸性氨基酸、富含谷氨酰胺、富含脯氨酸等不同种类,以酸性结构域最多见; 3)连接区,即连接上两个结构域的部分。不与DNA直接结合的转录因子没有DNA结合域,但能通过转录激活域直接或间接作用于转录复合体而影响转录效率。

与DNA结合的转录因子大多以二聚体形式起作用,与DNA结合的功能域常见有以下几种:

1)螺旋-转角-螺旋(helix-turn-helix, HTH)及螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH) 这类结构至少有两个α螺旋,其间由短肽段形成的转角或环连接,两个这样的motif结构以二聚体形式相连,距离正好相当于DNA一个螺距(3.4nm),两个α螺旋刚好分别嵌入DNA的深沟。 2)锌指(zinc finger) 其结构如下图所示,每个重复的“指”状结构约含23个氨基酸残基,锌以4个配价键与4个半胱氨酸、或2个半胱氨酸和2个组氨酸相结合。整个蛋白质分子可有20个这样的锌指重复单位。每一个单位可以其指部伸入DNA双螺旋的深沟,接触5个核苷酸。例如与GC盒结合的转录因子SP1中就有连续的3个锌指重复结构。

3)碱性-亮氨酸拉链(basic leucine zipper, bZIP),该结构的特点是蛋白质分子的肽链上每隔6个氨基酸就有一个亮氨酸残基,结果就导致这些亮氨酸残基都在α螺旋的同一个方向出现。

两个相同结构的两排亮氨酸残基就能以疏水键结合成二聚体,该二聚体的另一端的肽段富含碱性氨基酸残基,借其正电荷与DNA双螺旋链上带负电荷的磷酸基团结合。若不形成二聚体则对DNA的亲和结合力明显降低。在肝脏、小肠上皮、脂肪细胞和某些脑细胞中有称为C/EBP家族的一大类蛋白质能够与CAAT盒和病毒增强子结合,其特征就是能形成bZIP二聚体结构。

从上述可见:转录调控的实质在于蛋白质与DNA、蛋白质与蛋白质之间的相互作用,构象的变化正是蛋白质和核酸“活”的表现。但对生物大分子间的辨认、相互作用、结构上的变化及其在生命活动中的意义,人们的认识和研究还只在起步阶段,其中许多内容甚至重要的规律我们可能至今还一无所知,有待于努力探索。

9.为什么说转录激活是基因表达调控的基本环节? 因为基因表达的多级水平调控的,其中转录起始是基因表达调控的限速步骤,因为转录激活调节步骤特异性强、涉及面广,包括DNA序列、调节蛋白、DNA-蛋白质、蛋

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白质-蛋白质之间的相互作用、所有上述因素对RNA聚合酶活性的影响等。

10.为什么真核生物中转录和翻译无法偶联?

真核生物的转录发生细胞核内,而翻译发生在细胞质内。此外,转录初级产物需要多步加工后才能进行翻译。

11.反式作用因子的DNA结合结构域的结构模式有哪几种?分别写出其结构特点。

1)锌指结构

2)同源结构域具有螺旋-回折一螺旋结构。

3)亮氨酸拉链结构使两个单体结合并形成DNA结合域。

4)螺旋环-螺旋结构易于形成二聚体:螺旋区形成反式作用因子的二聚体,碱性氨基酸区结合DNA。

5)碱性α螺旋含较多的碱性氨基酸:转录复制因子CTF/NF-1的DNA结合区域具有碱性α一螺旋结构 ,并含有高密度的碱性氨基酸,锌指结构、同源结构域及亮氨酸拉链结构。

6)β折叠

12. 型的真核基因的结构

①编码序列—外显子

②插入外显子之间的非编码序列—内含子 ③5'-端和3'-端非翻译区

④调控序列(可位于上述三种序列中)

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