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醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白实验报告(2)

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4、电泳

将点样端的薄膜平贴在阴极电泳槽支架的滤纸桥上(点样面朝下),另一端平贴在阳极端支架上(见下图)。要求薄膜紧贴滤纸桥并绷直,中间不能下垂。

连接好电泳仪。在室温下电泳,打开电源开关,调节电流强度0.3mA/cm膜宽度电泳时间约为1h。电泳后,关闭电泳仪切断电源。 5、染色:

电泳完毕后将薄膜取下, 放在含氨基黑10B染色液的培养皿中浸泡5-10min。(染色液回收) 6、漂洗:

将薄膜从染色液中取出,自来水下冲洗除去多余的染色液后放入盛有漂洗液的培养皿中漂洗,直至背景蓝色脱尽,条带清晰为止,可得到色带清晰的电泳图谱 。 7、透明

将脱色吹干后的薄膜浸入透明甲液中2min,立即放入透明乙液中浸泡1min,取出后立即紧贴于干净玻璃板上,两者间不能有气泡。约2min—3min薄膜完全透明。若透明太慢可用滴管取透明乙液少许在薄膜表面淋洗一次垂直放置待其自然干燥,或用吹风机冷风吹干且无酸味。再将玻璃板放在流动的自来水下冲洗,当薄膜完全润湿后用单面刀片撬开薄膜的一角,用手轻轻将透明的薄膜取下,用滤纸吸干所有的水分,最后将薄膜置液体石蜡中浸泡3min,再用滤纸吸干液体石蜡,压平。此薄膜透明,区带着色清晰,可用于光吸收计扫描。

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