泡菜中亚硝酸盐的检验
实验组长:陈佶
实验组员:郝吴双 石行健 丁逸苇 吴纪轩 吕志轩 实验日期:11月23日 ~ 12月6日 实验准备(资料查阅):
心得体会:
这是我们第一次进行食品分析与检验实验课程。实验内容是食品中亚硝酸盐含量的测定。在这其中我学会了用盐酸萘乙二胺测量亚硝酸含量的基本操作技术,拓展了视野,无论将来我是否会从事生物方面的工作,这都将是我的一笔宝贵财富。
感谢老师耐心的讲解,使得我们对实验的各项要求目的都有了明确的掌握。但由于水平有限,实验报告中定有纰漏错误,请老师不吝赐教!
一、前言
“亚硝酸盐”这一名词对我们来说并不陌生,这是一类无机化合物的总称。主要指亚硝酸钠,这是一种白色至淡黄色粉末或颗粒状,味微咸,易溶于水。其外观及滋味都与食盐相似,并在工业、建筑业中广为使用,肉类制品中也允许作为发色剂限量使用。由亚硝酸盐引起食物中毒的机率较高。食入0.3~0.5克的亚硝酸盐即可引起中毒甚至死亡。
我们通过实验测定了泡菜中不同时期的亚硝酸盐的含量,这不仅是一次美妙的实践,更为我们的生活提供了指南,让我真真正正的接触到了这个平时只出现在报道上的奇妙物质。
二、实验原理
泡菜的制作离不开乳酸菌,乳酸菌是厌氧细菌,在无氧的情况下,将葡萄糖分解成乳酸。这其中也生成了一定量的的亚硝酸盐。
在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。
三、设备及试剂
泡菜坛、蔬菜、三角瓶、量筒、烧杯、pH试纸、玻璃棒、微量可调移液器、试管、亚硝酸盐含量的测定试剂盒。
四、实验
※泡菜制作
实验准备:泡菜坛子一个、高粱白酒、花椒、辣椒、大料、冰糖、盐。
具体制作方法如下:
(1)各种菜(萝卜、白菜等)洗净并切成3~4cm长的小块。
(2)按照清水与盐的质量比4:1的比例配制盐水,将
盐水煮沸冷却。
(3)将经过预处理的新鲜蔬菜混合均匀,装入泡菜坛内,使盐水没过全部菜料,盖好坛盖。
(4)将坛口用水封好,防止外界空气进入。
(5)泡菜发酵。
泡菜菌属于厌氧菌,注意坛口的密封十分重要。
※亚硝酸盐检验 检测原理:
在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应生成重氮盐,重氮盐与N-1-萘基乙二胺盐酸盐偶合形成玫
瑰红色染料,产生的颜色深浅与亚硝酸根含量成正比,通过与标准比色板的进行目测比较,可大致估算出待检测样品中的亚硝酸盐的含量。 实验步骤:
1、制备标准显色液
制备50ml浓度梯度的亚硝酸钠标准液,分别含有1、2、3、4、5、7.5ug亚硝酸钠(见PPT里面的实验结果图),观察记录颜色变化及其标准曲线。 2、制备样品处理液
40g泡菜 取出 泡菜汁烧杯① 获20ml汁液 10ml汁液 + 20ml蒸馏水+10ml提取剂+4mlNaOH 定容至50ml 容量瓶② 过滤后取出 6ml滤液 滤液烧杯③ + 4mlAl(OH)3 定容至10ml 取出 +Al(OH)3烧杯④ 3 4ml提取液 +200ul对氨基苯磺酸+100ul N-1-萘基乙二胺盐酸盐+700ulH2O至总体积5ml 样品液烧杯⑤ 3、比色 将5ml样品检测液在分光光度计(特异性检测亚硝酸钠的550nm波长)进行吸光光度测定,根据标准曲线测出样品的浓度。 设置空白对照2管
[2*4ml蒸馏水+2*200ul对氨基苯磺酸+2*100ul N-1-萘基乙二胺盐酸盐+2*700ulH2O至总体积2*5ml]
空白对照烧杯⑥
五、实验结果
分析:
适当消除误差后,可以发现泡菜中亚硝酸盐的含量先增多后减少,在泡菜制作一周后达顶峰0.56毫克每千克。
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