体细胞杂交技术在马铃薯遗传育种研究中的应用———袁华玲,金黎平,谢开云,等 357
2FGHI:S532,S330LMNOP:A(2005)06-0357-05LQRI:1672-3635
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袁华玲,金黎平,谢开云,屈冬玉*
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‘a:体细胞杂交技术是打破有性杂交不亲和障碍,将野生种优良性状引入普通栽培种,丰富马铃薯遗传
基础,创造新种质的有效手段。本文在原生质体的分离融合、融合体的筛选、杂种的鉴定等方面对马铃薯体细胞杂交技术进行综述的基础上,介绍了近年来马铃薯体细胞杂交技术的研究进展,并就体细胞杂交技术在马铃薯遗传研究育种上的应用进行了阐述。
bcd:马铃薯;体细胞杂交;遗传育种
我国是马铃薯生产大国,近年来生产面积和产量逐年上升,但是生产上所用的马铃薯普通栽培种遗传基础比较狭窄,存在着抗病抗逆性差、品质性状有待于提高等问题[1]。在新品种选育过程中,用遗传基础狭窄的普通栽培种进行种内杂交,后代的遗传异质性差,优势不明显,难以选育出突破性的品种。此外在马铃薯普通栽培种中特别缺乏抗病和抗逆的基因,因此丰富育种材料的遗传基础,创造新种质资源是品种选育跨上新台阶的关键。
马铃薯的种质资源十分丰富,国际马铃薯中心收集的马铃薯种质有235个种,其中74%为野生种和近缘种,在这些野生种和近缘种中存在着许多优良性状,如抗病虫性、抗逆性,优良品质等,将这些基因引入马铃薯普通栽培种中,丰富马铃薯普通栽培种中的遗传基础,创造新的种质用于马铃薯品种改良有着重要意义。但是马铃薯普通栽培种是同源四倍体植物,基因分离复杂,具有丰富遗传基础的野生种质资源大多数是二倍体,马铃薯普通栽培种与野生种杂交时存在着杂交不亲和性,难以成
TUVW:2005-07-28
(1965-),女,博士研究生,研究方向:马XYZ[:袁华玲铃薯体细胞杂交。
“863”计划项目“马铃薯高效育种技术及\]^_:国家十五
优质高产多抗专用新品种选育”(2004AA241130)资助;国家十五“863”重大专项“优质抗病马铃薯倍性技术育种与利用”(2002AA207011)资助。
功,限制了野生种质资源中优良基因的利用。通过体细胞杂交可以打破有性杂交不亲和障碍,在近缘的种内或种间,甚至远缘的科属间产生体细胞杂种,扩大遗传变异范围。
1
1.1
马铃薯体细胞杂交技术的研究
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体细胞杂交第一步是分离有活力的原生质体并
有效地再生出植株,在许多的已发表的报道中,引用较多的是Shepard等[2],Binding等[3],Haberlach等[4]报道的原生质体分离和培养条件。所用的原生质体起始培养基、愈伤组织形成培养基、以及诱导分化培养基都是MS、B5、KM、VKM、V47等基本培养基或略加修改,有研究表明,对外植体进行黑暗培养前处理有利于提高原生质体的产量,基因型的不同对原生质体的再生能力有影响[5]。
在已知的诱导原生质体融合的方法中,最经常使用的是聚二乙醇(PEG)诱导和电融合。在马铃薯体细胞研究早期,较多采用PEG化学诱导方法进行细胞融合,由于操作复杂,技术性要求较高,目前多采用电融合的方法。
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原生质体融合目前还难以达到一对一特异性融
合,融合后的产物包括融合亲本以及同核体、异核体,有必要通过选择将所需要的异核体筛选出来。已知的很多选择体系在马铃薯异核体的选择上均有
*通讯作者:E-mail:potatovif@yahoo.com
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